解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn1液压冲击脑损伤模型1.实验原理液压冲击损伤模型由来已久,是通过向颅腔内快速注入生理盐水造成创伤性脑损伤。2.实验目的造成创伤性脑损伤。3.实验材料3.1主要试剂生理盐水等。解螺旋http://www.helixlife.cn/3.2主要仪器该装置分两部分,横放的圆形中空钢化玻璃柱(长60cm,直径41.5cm)和打击架。圆形玻璃柱(内为37℃生理盐水)装有损伤轴和传感器的一端接触大鼠,负责制造损伤和监测压力,而装有活塞的一端则与打击架相连,活塞受打击后推动盐水进入颅腔。液压冲击损伤装置打击架上装有一钟摆样打击锤。通过调节打击锤的高度调节压力大小,致伤时传感器可直接读出致伤压力。根据打击部位不同模型可分为正中打击和侧方打击,正中打击可造成严解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn2重脑干损伤,侧方打击脑损伤主要在对冲侧。该模型的缺点是:打击机制与人的受伤机制不一致,可造成严重的脑干和脊髓损伤。3.3实验动物成年雄性SD大鼠(250-300g)或成年雄性C57/BL6小鼠(20-25g)4.实验步骤1.冲击前24小时,用2%戊巴比妥钠经腹腔麻醉。无菌切开皮肤,用魔钻磨出一个直径约2mm的骨孔(利用小鼠脑立体定位图谱对小鼠海马结构进行空间定位。选择前卤点后方2mm,矢状缝右侧2mm作为圆心),保证硬膜玩好无破损。2.用氰基丙烯酸酯粘合剂将不锈钢螺母粘接与钻孔处,螺母周围用磷酸锌分和硅胶H(1:5)经氰基丙烯酸酯调成的糊状粘合剂固定。3.实验前,动物用戊巴比妥钠麻醉,于储液管中住满37℃生理盐水,与螺母连接,设置打击压力(轻型、中型、重型损伤参考:60-80、160-180、260-280kPa),打开压缩空气钢瓶阀门即冲击装置开关,是生理盐水冲击动物脑部,记录冲击瞬间脑局部受力大小。冲击时程约20ms。解螺旋http://www.helixlife.cn/4.冲击后,取下动物,骨蜡封闭钻孔,缝合切口。5.观察指标:①生命体征及死亡率:观察造模后动物生命体征(呼吸、运动、抽搐、意识等)及死亡数,计算死亡率。②mNSS评分③MIR检查:造模后不同时间对动物进行头部MRI检查,包括T1像、T2像、脑弥漫性轴索损伤(DAI)等④Morris水迷宫实验(选做)⑤脑组织含水量及组织学观察:在建模后不同时间点mNSS评分、MIR检查等步骤后,用氯胺酮过度麻醉,4%多聚甲醛经心灌注,开颅取脑,以经过挫伤灶的横线为极限,在极限前侧取约200mg脑组织用于测定含水量;去挫伤灶后约4mm厚的脑组织进行固定和石蜡包埋,切片后进行苏木素-伊...