解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn1细胞周期检测实验1.实验原理细胞周期（cellcycle）是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程。细胞周期是细胞生命活动的基本过程，细胞在周期时相的变迁过程中进入增殖、分化、衰老和死亡等生理状态。体外研究发现，大多数细胞的细胞周期为10到48小时。主要分为4期:G1期——DNA合成前期，是细胞周期的关键步骤。细胞周期长短决定于G1期长度；S期——DNA合成期；G2期——DNA合成后期；M期——有丝分裂期。M期一结束，2个子代细胞就形成了。这也标志着这一轮细胞周期的结束。在细胞周期的全过程中，还有两个检查点（check-point）。这两个检查点分别是G1/S期检查点和G2/M期检查点。1）G1/S期检查点，控制着细胞从静止状态进入DNA合成期的调控；2）G2/M检查点的作用是：决定细胞是否一分为二，形成两个子代细胞。如果通过G2/M检测点，细胞的染色体收缩，有丝分裂开始。这两个检查点能够监视细胞周期调控的运作，确保基因和遗传物质准确遗传到子代细胞中。细胞周期调控是在上述检查点控制下，通过各种调控因子的激活和灭活，使细胞依次启动和完成细胞周期循环的过程。解螺旋http://www.helixlife.cn/2.实验目的（1）作为生物相容性评价指标；（2）用于研究细胞凋亡；（3）作为选择细胞的依据。3.实验材料3.1.主要试剂（试剂来源仅供参考）试剂来源Cat.No.RIPA碧云天P0013CPMSFBio-RadMSB1001PierceBCAProteinAssayKitThermoScientific23225解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn24XLeammli加样缓冲液Bio-Rad1610747β巯基乙醇Sigmaaldrich60-24-2ProteinMarker天能180-6003脱脂奶粉生工A600669WesternBlotStrippingBufferThermoScientific21059ECLWesternBlottingSubstrateThermoScientific32106TrizolInvitrogen15596-026三氯甲烷Bio-RadMSB1001Nuclease-FREEWaterInvitrogenAM9938异丙醇国药集团化学试剂有限公司80109218乙醇国药集团化学试剂有限公司10009218DEPC处理的水碧云天M-MLVpromegaM1705dNTPpromegaU1240oligodT上海生工B0205RnaseInhibitorpromegaN2115GXDkitiqSYBRGreenBio-Rad1708882APGXD封膜Bio-RadMSB1001PCR无色薄壁管（平盖）AXYGENUS-PCR-02-C3.2.主要仪器解螺旋http://www.helixlife.cn/仪器名称来源型号离心机ThermoScientificMicro17R恒温金属浴佑宁仪器MiniH-100L酶标仪BioTekEpoch-256600电泳仪上海天能EPS-300凝胶成像系统上海天能Tanon-600qPCR...
