中国病理生理杂志chneseJournalofPa!0pI0：三!!!二!：![文章编号]1000—4718{2004)02—0175—05体外定量测定细胞迁移方法的建立及应用*梁光波，张国平，金惠铭，汤大侃(复旦大学上海医学院生理与病理生理学系，生物医学工程学系，上海200032)[摘要]目的：在体外细胞划痕损伤模型中建立定量测定ECV一304细胞迁移的方法。方法：改良了体外细胞划痕损伤模型。用显微电视图像定量处理系统定量测定细胞迁移。在体外细胞划痕损伤模型中观察了肝素(hep一)和凝血酶敏感蛋白一1(thrombospo一-din一1)对ECV一304迁移的影响。结果：120次划痕模型中划痕损伤的平均宽为(0．95±0．08)ram，长(51．20±3．40)mm，迁移细胞可在48h一72h内完全覆盖划痕区。24h左右细胞迁移达高峰。在体外损伤划痕损伤模型中与对照组比，肝素对ECV一304迁移起明显促进作用，一1起明显抑制作用。结论：建立了一种在体外细胞划痕损伤模型中进行细胞迁移的定量测定方法。用此方法证明，肝素能促进ECV一304细胞迁移，TSP一1抑制迁移。[关键词]细胞运动；ECV一304细胞；肝素；凝『{Ⅱ酶敏感蛋白1[中图分类号]R363[文献标识码]A血管新生(angiogenesis)主要指在原有的毛细血管与／或微静脉基础上通过血管内皮细胞的增殖和迁移，从先前存在的血管处以芽生或非芽生(或称套迭，intussusception)的形式生成新的毛细血管。在个体发育和器官组织形成、组织损伤修复、肿瘤、缺血性心血管病等过程中都有血管新生_1j。血管新生与成人疾病关系非常密切[2J。在多种疾病血管新生的理论研究与实验治疗中，为了抑制血管新生(如肿瘤时)或促进血管薪生(如缺血性心血管疾病时)必须研究毛细血管内皮细胞的增殖(prohfemtion)与迁移(migration)的变化_3J。血管内皮细胞增殖与迁移的变化直接影响到毛细血管管腔样结构(tube—likestructure)的形盛_4．5j，然后通过血管新生的抑制或增强可影响某些疾病的发生发展与结局。因此血管内皮细胞迁移的研究在血管新生中具有重要的理论意义与实用价值。为了更好地在体外研究血管内皮细胞的迁移，首先必需建立有效的定量测定与评价细胞迁移能力的方法_6j。但是至今缺乏一种比较可靠实用的定量技术。本实验用自制的工具建立了体外ECV一304细胞划痕损伤模型，并在此模型中，采用我们建立的显做电视电脑测量系统，定量检测细胞划痕损伤处体外培养的ECV一304细胞的迁移能力。初步定量观察了血管新生诱导因子肝素(heparin)及血管新生抑制因子凝[收稿13期]2003—07—10[修回日期]2...
