微生物的生长及其控制一、微生物的生长•个体生长:同化作用速度超过异化作用,原生质总量(重量、体积、大小)不断增加,出现个体生长。个体生长个体繁殖群体生长•群体生长=个体生长+个体繁殖•微生物学中的“生长”均指群体生长。1、测定生长量的方法•直接法•间接法直接法•测体积:适用于菌量大的样品,初步比较用。待测培养液置于刻度离心管中→沉降或离心→计算菌体体积(包括细胞体积和细胞之间的空隙体积)•称干重:适用于菌量大的样品。离心法:离心→干燥[100~105℃或红外线烘干或真空干燥(40℃或80℃)]→称干重过滤法:过滤(滤纸或醋酸纤维膜过滤)→洗涤→真空干燥(40℃)→称干重间接法•比浊法原生质含量↑→培养液浊度↑用分光光度计测出待测培养液的浊度,对照标准曲线,求出菌体浓度,结果为相对值。不适用于含非细胞固形物多的样品和丝状微生物。•生理指标法:测含氮量,含碳量,P、DNA、RNA、ATP、DAP、N-乙酰胞壁酸的含量。Limitationsofturbiditycount•IndirectcountingDeadcellsandlivingcellsarenotdistinguishedParticlesinculturedisturbmeasurement•Notgoodathighconcentrations2、Totalcounts(全菌计数法)•血球计数板法(countingchamber):常规方法用血球计数板在显微镜下直接计数。•LimitationsofmicroscopiccountDeadcellsandlivingcellsareallcountedSmallcellsaredifficulttocountNeedhighcellconcentration,106cells/ml血球计数板•1个大方格分为25个中方格,每个中方格分为16个小方格•1个大方格分为16个中方格,每个中方格分为25个小方格•计数室容积=1×1×0.1mm3•1ml菌液中的总菌数=×25×104×稀释倍数1ml菌液中的总菌数=×16×104×稀释倍数计菌器5A5A3、Viablecounts(活菌计数法)•Platecounting(平板菌落计数法):不适用于严格厌氧菌Spread-platemethod(平板表面涂布法)Pourplatemethod(琼脂培养基浇注法)Limitationsofplatecounting•ToomanyvariablesInoculumsizeSuitabilityofmediumIncubationconditionsLengthofincubationSizeofcoloniesSinglecolonymayarisefrommorethanonecell-cellclump•cfu/ml:colony-formingunit/ml4、酵母活细胞计数•美蓝染色法活细胞无色,死细胞为兰色。原理:美蓝是一种弱氧化剂,氧化态呈兰色,还原态呈无色。活的酵母细胞因新陈代谢的不断进行,具有一定的还原能力,能将进入细胞的美蓝...