噬菌体展示技术的原理及应用(Keywords:Phagedisplay)1、噬菌体展示技术的原理2、噬菌体展示技术的应用现状3、噬菌体展示技术应用于水产养殖业4、展望一、噬菌体展示技术的原理LeadHvLinkLvEPIII融合蛋白PIII基因型表达型噬菌体展示技术是将各种多肽或蛋白质以融合蛋白的形式表达并展示在噬菌体表面，同时将其遗传密码包含于噬菌体内部，这使得蛋白质的功能与其基因密码有机的连结在一起。选择方法：淘选（Panning)而不是筛选（Screening)非展示系统展示系统SolidphaseselectionwithimmunotubesBBBBBBvvImmunotubecoatedwithantigencoatedwithsteptavidinandbiotinylatedantigenBbiotinantigenSolutionphaseselectionwithbiotinylatedantigenBindtoStreptavidincoatedmicrotitrewellsWashtoremoveunboundphageparticles.EluteboundphageAmplifyelutedphageRepeatselectionAnalyzea)ELISAb)Specificityc)Sequencingd)Affinitye)ActivityE.coli感染和扩增••固相•淘选系统完整细胞•组织，器官•常规法•淘选方法正负法•竞争法•噬菌体展示技术最关键的优势有三：•第一，淘选的高效率使得在极低的存在水平下，挑选到高亲和力噬菌体成为可能；•第二，所挑选到的噬菌体可在微量存在的情况下，通过感染细菌得到富集；•第三：展示的多肽或蛋白质与其包含在噬菌体内部的基因密码的连接，使得结合肽或蛋白质的序列分析既快速又简便。••噬菌体（M13,T7,T4,)•病毒（反转录病毒，杆状病毒）•表面展示系统细菌（葡萄球菌，E.Coli)•酵母•体外共价连接（蛋白—DNA,•蛋白—RNA)•诊断•被动免疫•抗体蛋白质结构分析•药物导航•蛋白质纯化应用范围：•受体—配体•信息传递•蛋白质—蛋白质诘抗剂•蛋白质—DNA抑制剂•蛋白质—其他•多肽诊断•基因表达控制•中和活力•药物及药物导航•酶及底物噬菌体抗体库的构建AntibodyIgGstructureAntibodyIgGstructureVHVLCLCH1CH2CH3Hinge(Fab’)2FabFcMembraneExtensionAntibodyIgGstructureVHVLCLCH1CH2CH3AntibodyIgGstructureVHVLCLCH1CH2CH3FvFvVHVLscFvVHVLSingleChainFragmentvariable单克隆抗体噬菌体抗体杂交瘤技术展示技术宿主细胞:杂交瘤细菌筛选范围:~103107109时间:几个月几周操作:繁杂相对简单免疫:必须可避免人源抗体:+费用:高低二、噬菌体展示技术的应用现状1.抗体：抗狂犬病毒的单链抗体，抗HIV-1囊膜糖蛋白的单链抗体，此抗体可专一性杀死被HIV-1感染并表达有gp120的淋巴细胞,中和响...
