第３１卷第６期河南城建学院学报Ｖｏｌ．３１Ｎｏ．６２０２２年１２月ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＵｒｂａｎＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎＤｅｃ．２０２２收稿日期：２０２２－０５－１２基金项目：国家自然科学基金（３１９０１６６５）作者简介：叶延欣（１９８８—），男，河南叶县人，博士，讲师，研究方向：食品发酵技术。通信作者：徐振上（１９９０—），男，河北邢台人，博士，硕士生导师，研究方向：食品微生物技术。文章编号：１６７４－７０４６（２０２２）０６－００７９－０６ＤＯＩ：１０．１４１４０／ｊ．ｃｎｋｉ．ｈｎｃｊｘｂ．２０２２．０６．０１３大肠杆菌分泌表达纳豆激酶及体外溶栓特性分析叶延欣１，２，李蕾蕾１，２，宋书涵１，张杰１，刘亚琼１，洪军１，２，徐振上３（１．河南城建学院生命科学与工程学院，河南平顶山４６７０３６；２．河南省健康食品工程技术研究中心，河南平顶山４６７０３６；３．齐鲁工业大学生物工程学院，山东济南２５０１０４）摘要：以ＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓＮＫ４基因组为模板，克隆出纳豆激酶（Ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅ，ＮＫ）前导肽与成熟肽编码基因（ＮＫ），并采用同源重组方法将其与已报道的功能肽编码基因Ｃｅｌ或Ｆｅ及线性化质粒ｐＥＴ－２２ｂ构建出重组表达载体ｐＥＴ２２ｂ－Ｃｅｌ－ＮＫ与ｐＥＴ２２ｂ－Ｆｅ－ＮＫ，并转化于Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中进行诱导表达。经ＩＰＴＧ诱导表达后，实现了重组ＮＫ在大肠杆菌中的重组表达并具有生物活性，但ＳＤＳ－ＰＡＧＥ仅检测到重组酶Ｃｅｌ－ＮＫ的可分泌表达及其具有酶催化活性，酶活力为（３．３６±０．５６）ＩＵ／ｍＬ，体外溶栓实验也表明该重组酶ＮＫ具有良好的体外溶栓效果，表明Ｃｅｌ有助于介导蛋白ＮＫ可活性分泌表达。关键词：纳豆激酶；同源重组；分泌表达；酶催化活性；体外溶栓中图分类号：Ｑ９３９．９开放科学（资源服务）标识码（ＯＳＩＤ）：文献标识码：ＡＳｅｃｒｅｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅｉｎＥ．ｃｏｌｉａｎｄｉｔｓｔｈｒｏｍｂｏｌｙｔｉｃｐｒｏｐｅｒｔｙｉｎｖｉｔｒｏＹＥＹａｎ⁃ｘｉｎ１，２，ＬＩＬｅｉ⁃ｌｅｉ１，２，ＳＯＮＧＳｈｕ⁃ｈａｎ１，ＺＨＡＮＧＪｉｅ１，ＬＩＵＹａ⁃ｑｉｏｎｇ１，ＨＯＮＧＪｕｎ１，２，ＸＵＺｈｅｎ⁃ｓｈａｎｇ３（１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｅｎｇｉｎｅｅｒ...
