浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:58实验时间:9月28日11:30-20:00请勿透露学校、教师和个人信息流式细胞术检测细胞凋亡和细胞内ROS(3)【实验结果】1.细胞凋亡实验结果:AnnexingⅤ-FITC/PI双染色的细胞在流式细胞仪上分为4个区域。其中Q1区为机械性损伤的细胞碎片,Q2区为中晚期凋亡细胞和坏死细胞,Q3区为活细胞,Q4区为早期凋亡细胞,Q2+Q4所占百分比为细胞的总凋亡率。如图1表1所示。与正常对照组5%±2%的总凋亡率相比,模型组的总凋亡率为43%±5%,差异显著,P<0.01;麦冬多糖从25μg/mL到200μg/mL干预组其细胞的总凋亡率分别为25±5%,24±2%,25±6%,26±4%,与模型组相比差异显著P<0.01;各药物组之间无明显的差别P>0.05。表1流式细胞术检测HUVEC细胞凋亡(,n=3)组别细胞总凋亡率(Q2+Q4)对照组5±2%模型组43±5%##OJP1-25组25±5%**OJP1-50组24±2%**OJP1-100组25±6%**OJP1-200组26±4%**##:与正常组比较P<0.01;**:与模型组比较P<0.01OJP1-25,麦冬多糖25mg/kg组;OJP1-50,麦冬多糖50mg/kg组;OJP1-100,麦冬多糖100mg/kg组;OJP1-200,麦冬多糖200mg/kg组。浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:58实验时间:9月28日11:30-20:00请勿透露学校、教师和个人信息图1流式细胞术检测HUVEC细胞凋亡2.细胞内ROS检测结果:如图2所示。与正常对照组相比,模型组细胞经H2O2损伤后,细胞ROS含量显著增加(P<0.01);与模型组相比,不同浓度的麦冬多糖干预后ROS的含量均显著降低(P<0.05,P<0.01)。从图可见,麦冬多糖浓度从200μg/mL降低到50μg/mL,ROS的含量逐渐减少。麦冬多糖浓度减低到25μg/mL时期ROS的含量又稍微增高。浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:58实验时间:9月28日11:30-20:00请勿透露学校、教师和个人信息注:##:与正常组比较P<0.01;*:与模型组比较P<0.05;**:与模型组比较P<0.01。OJP1-25:麦冬多糖25μg/mL组;OJP1-50:麦冬多糖50μg/mL组;OJP1-100:麦冬多糖100μg/mL组;OJP1-200:麦冬多糖200μg/mL组。图2麦冬多糖对H2O2损伤HUVEC细胞ROS的影响(,n=6)【结果讨论】H2O2可诱导细胞的氧化损伤,而氧化反应可以参与内皮细胞病理变化的各个环节,在血管性疾病的病理过程中起非常重要的作用。氧化损伤的早期,表现为多种特征的细胞凋亡。有研究报道H2O2诱导细胞凋亡,当内皮细胞处于低浓度的H2O2时,细胞表现为凋亡,且有时间与浓度依赖性。而处于高浓度的H2O...