不同浓度双氧水对细胞抑制作用（1）【实验目的】筛选双氧水对HUVEC细胞损伤的最适浓度，用于进一步实验。【实验原理】双氧水能够对细胞产生损伤作用，用MTT法可以检测细胞的活性，从而检测出双氧水对HUVEC细胞损伤的最适浓度。【实验仪器、试剂和材料】1.实验仪器：CO2培养箱、倒置显微镜、96孔培养板、酶标仪等。2.实验试剂材料：人脐静脉内皮细胞、双氧水、10%胎牛血清1640培养液、MTT试剂盒等。【实验步骤】1.从培养瓶中吸出原培养液，用PBS冲洗两次。2.加入胰蛋白酶，镜下观察，细胞变圆即吸弃消化液。3.静置一分钟后加入1640培养液2mL，将细胞吹打成细胞悬液（约3min）。4.调整细胞浓度至5×104个/mL。5.实验分组：空白调零孔A1、A2分别加入100μL1640培养基，无细胞；正常对照组、H2O2组（分200μmol/L、250μmol/L、300μmol/L、350μmol/L、400μmol/L5个浓度）每组设6个复孔。每个实验组加细胞悬液100μL6.将96孔板置入37℃、5%CO2的孵箱中孵育24h。
