河北医科大学硕士学位论文麦冬多糖对脂肪细胞胰岛素敏感性作用机制的实验研究姓名：陈莉申请学位级别：硕士专业：药理学指导教师：李灵芝201203中文摘要麦冬多糖对脂肪细胞胰岛素敏感性作用机制的实验研究摘’要目的：探索麦冬多糖在干预2型糖尿病．胰岛素抵抗(T2DM．IR)中所发挥的药理作用以及作用机制，进而为麦冬多糖在临床上的开发研究到应用提供更充分的理论依据。方法：1．3T3．L1前脂肪细胞的培养和脂肪细胞的诱导分化及脂肪细胞的鉴定：用含有O．5mmol／L3．异丁基．1．甲基黄嘌呤、l}|mol／L地塞米松和10舭胰岛素的DMEM培养液诱导3T3．L1前脂肪细胞分化为3T3-L1脂肪细胞表型，用油红O染色法鉴定脂肪细胞。2．地塞米松诱导3T3．L1脂肪细胞胰岛素抵抗细胞模型：首先确定应用于诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的最佳地塞米松浓度，地塞米松终浓度分别设置为10nmol／L、100nmol／L、lgmol／L、101amol／L，根据各实验组中3T3-L1脂肪细胞上清液葡萄糖含量确定胰岛素抵抗的最佳地塞米松浓度，然后诱导构建3T3．L1脂肪细胞胰岛素抵抗细胞模型。3．麦冬多糖对胰岛素抵抗3T3．L1脂肪细胞的作用：用含有终浓度为lgrnol／L地塞米松的DMEM高糖培养液培养构建3T3．L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型。实验分组：模型对照组(Control，C)：不含任何药物的培养基；阳性对照罗格列酮组(Rosiglitazone，ROS)：罗格列酮终浓度为lxlO巧tool／L；麦冬多糖低浓度组(LowdoseofOPSR，L)：麦冬多糖终浓度为lxl04mol／L；麦冬多糖中浓度组(MeidumdoseofOPSR，M)：终浓度为lxl0弓mol／L；麦冬多糖高浓度组(HighdoseofOPSR，H)：麦冬多糖终浓度为lxl0-4mol／L。计算各胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞实验组较对照组葡萄糖利用差异(比较剩余葡萄糖浓度大小的差异来反映)；ELISA方法检测各实验组3T3．L1脂肪细胞上清液中肿瘤坏死因子TNF一伐的表达量；westemblot和RT-PCR方法检测各实验组3T3．L1脂肪细胞瘦素、脂联素、抵抗素蛋白和mRNA的表达水平。实验数据应用统计软件SPSS18．0进行统计分析，P<0．05差异有显著性。结果：1．细胞形态学以及油红O染色所示的特征变化证实3T3．L1脂肪细胞中文摘要诱导分化是理想的。2．地塞米松抑制3T3．L1脂肪细胞的基础状态糖转运，且这种抑制作用呈浓度依赖性，应用终浓度为1m'nol／L的地塞米松可以诱导3T3．L1脂肪细胞构建胰岛素抵抗细胞模型。3．各组葡萄糖剩余浓度高低趋势为：模型对照组≥麦冬多糖低浓度组>麦冬多糖中浓度组>麦冬多糖高浓度组≥阳...
