40鸭源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因floR的流行调查.pdf

安徽农业科学，J o u r n a l o f A n h u i A g r i S c i 2 0 1 2，4 0(2 8)：1 3 8 2 81 3 8 2 9，1 3 8 3 4 责任编辑乔利利 责任校对况玲玲 鸭源大肠杆菌氟苯尼考耐药基 因f o R的流行调查 吴华 ，冯建坤 ，贺志沛 ，刘保光 ，胡功政h ，(1 河南农业大学牧医工程学 院，河 南郑州 4 5 0 0 0 2；2 西藏 职业技术学院畜牧兽医系，西藏拉 萨 8 5 0 0 3 0)摘要 目的 了解我 国部分地区鸭源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因 o R在临床菌株 中的流行情况。方法 采用美国临床 实验室标准化 委 员会(C L S I)推荐的肉汤微量稀释法测定2 2 株鸭大肠杆菌对氟苯尼考等 9种药物的敏感性，并应用 P C R方法检测氟苯尼考耐药基 因 fl o R。f 结果 2 2 株鸭源大肠杆菌对氟苯尼考和四环素全部耐药，耐药率达 1 0 0，呈现多重耐药性特点；其氟苯尼考耐药基因fl o R检 出 率为9 0 9，与耐药表型基本一致。结论 氟苯尼考在我国部分地 区呈现高耐药性，对其耐药基 因的监测为临床抗菌药物的合理使用 提 供 了理论依 据。关键词 氟苯尼考；o R；耐药；P C R 中图分类 号S 8 5 8 3 2 文 献标识码A 文章编号0 5 1 76 6 1 1(2 0 1 2)2 81 3 8 2 8 0 2 De t e c t i o n o f t h e flo R Ge n e s i n F l o r f e n i c o 1 r e s i s t a n t E s c h e r i c h ia c o l i I s o l a t e d f r o m D i s e a s e d Du c k s W U Hu a e t a l (C o l l e g e o f A n i ma l S c i e n c e a n d Ve t e r i n a r y Me d i c i n e He n a n Ag r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y，Z h e n g z h o u He n a n 4 5 0 0 0 2)Ab s t r a c t 0 b i e c t i v e T 0 k n o w t h e p r e v a l e n c e o f flo R g e n e s i n t h e c l i n i c a l i s o l a t e s o f E s c h e r i c h i a c o l f r o m d u c k s i n s o me a r e a s i n C h i n a f Me t h o d 2 2 s t r a i n s o f Ec o l w e r e i s o l a t e d fr o m s i c k d u c k s T h e i r MI C s a g a i n s t 9 a n t i b a c t e ri a l a g e n t s w e r e d e t e r mi n e d b y t h e t w o fol d b r o t h mi e r o d i l u t i o n me t h o d a c c o r d i n g t o C l i n i c a l L a b o r a t o r y S t a n d a r d i z a t i o n I n s t i t u t e(C L S I)a n d_，2 o R g e n e s w e r e a m p l i f i e d b y P C R u s i n g e v e r y s t r a i n a s t e mp l a t e Re s u l t 2 2 s t r a i n s o f E c o l a l l e x h i b i t e d r e s i s t a n c e t o fl o r f e n i c o l a n d t e t r a c y c l i n e a n d o w n e d mu l t i p l e r e s i s t a n t p h e n o t y p e T h e d e t e c t i o n r a t e o f fl o R g e n e s w a s 9 0 9 ，w h i c h w a s i n a c c o r d a n c e w i t h t h e r e s i s t a n c e p h e n o t y p e I C o n c l u s i o n l 肋R r e s i s t a n t g e n e e x h i b i t e d h i g h d r u g r e s i s t a n c e i n s o me a r e a s o f C hi n a，t h r o u g h t h e mo n i t o rin g o f i t s d r u g r e s i s t a n c e g e n e s，s o me t h e o r e t i c a l b a s i s wa s p r o v i d e d f o r t h e r e a s o na b l e a p p l i c a t i o n o f c l i n i c a l a n t i b a c t e ria l d rug s Ke y wo r d s F l o r f e n i c o l：fl o R；D r u g r e s i s t a n c e：P C R 鸭源大肠杆菌病是 由致病性大肠埃希氏菌(E s c h e r i c h i a c o l i)引起鸭的一种烈性细菌性疾病。近年来，随着养鸭业向 规模化、集约化方向发展，鸭大肠杆菌病已成为危害养鸭业 的主要传染病之一，在一些规模化养鸭场中，饲养密度过高 和环境卫生条件较差等均可导致大肠杆菌病的暴发。由 于鸭大肠埃希氏菌血清型较多，且各地流行菌株不同，往往 给该病的免疫预防带来很大困难。因此，化学药物预防和 治疗仍是目前控制该病的主要手段。氟苯尼考系新型氯霉素类广谱抗菌药，为动物专用药，因具有抗菌谱广、吸收良好、体内分布广、无潜在致再生障碍 性贫血的副作用和使用安全的特点，在临床上被广泛使用。但随着用药的增多，临床上细菌对该药的耐药性问题 日益严 重。1 9 9 6年，K i m等首次从鱼的巴氏杆菌多重耐药 R质粒中 发现耐氟苯尼考的基因并将其命名为 p p n o 。近年来，鸡 源、鸭源和猪源大肠杆菌的耐氟苯尼考，2 o 基因也相继被报 道。为了解我国部分地 区鸭源大肠杆菌氟苯尼考耐药 基因，2 o 在临床菌株 中的流行情况，笔者应用 P C R方法检 测了氟苯尼考耐药基因 o R，旨在为临床抗菌药物的合理使 用提供理论依据。1 材料与方法 1 1 材料 1 1 1 菌株。2 2株鸭大肠杆菌，2 0 0 8年 9月至 2 0 0 9年2月 从四川、辽宁、河南等不同地区新病死鸭的肝脏中分离得到，基金项 目 作者简介 收稿 日期 国家 自然科学基金项 目(3 0 7 7 1 6 2 4)。吴华(1 9 7 4一)，女，河 南雎县人，实验 师，在读 博士，研 究方 向：细菌耐 药机制，E ma i l：h u a t o n g z h i 6 6 1 6 3 c o n。通讯 作者，教授，博 士，博 士 生导师，从事 兽 医抗 生素 药理 学研 究，E m a i l：y a o l i l a b 1 6 3 c o rn。2 O】2 5 2 2 经法国生物梅里埃 V I T E K 3 2全 自动细菌鉴定仪鉴定。质控 菌株为大肠埃希氏菌 A T C C 2 5 9 2 2，由我国普通微生物菌种保 藏中心提供。1 1 2 供试药剂。庆大霉素(C N)、新霉素(N)、阿米卡星(A K)、多西环素(D O X)、四环素(T E)均为国产原料药，含量 t9 6 ，均购 自河南郑州医药公司；多粘菌素 E(C T)、喹乙醇(O L A)、安普霉素(A P R)、氟苯尼考(F L O)均为国产兽用原 料药，含量均I9 5 均由河南牧翔动物药业有限公司惠赠。1 1。3 培养基。MH肉汤、麦康康琼脂、L B肉汤均购 自北京 陆桥有限责任公司。1 1 4 主要试剂与仪器。2 T a q M a s t e r M i x 酶，北京康为世 纪生物有限公司；D L 2 0 0 0 D N A Ma r k e r，宝生物丁程大连有限 公司；琼脂糖、5 0 T A E、荧光染料溴化乙锭(E B)均购 J：海 生工生物工程技术有限公司。高压蒸汽灭菌锅(浙江新丰医 疗器械有限公司)、数显水浴恒温振荡器(江苏金坛话峰仪器 有限公司)、E B A 2 1离心机(上海安亭科学仪器厂)、P C R仪(广东深圳赛克生物科技有 限公司)、D Y Y B C型电泳仪(北 京六一仪器厂)、紫外投射仪(上海君达仪器有 限公司)、凝 胶成像系统(美国 L a b n e t 公 司)、V I T E K 3 2全 自动细菌鉴定 仪(法国生物梅里埃公司)。1 2 方法 1 2 1 药敏试验。以大肠杆菌 A T C C 2 5 9 2 2作药敏质控菌，采用肉汤微量稀释法分别测定氟苯尼考等 l 0 种药物对鸭大 肠的 MI C值，3 7培养 1 8 2 4 h，观察并记录结果。1 2 2 模板的制备。采用煮沸裂解法制备模板 D N A。1 2 3 引物设计。据相关报道，从 G e n B a n k中读取大肠 杆菌氟苯尼考耐药基因flo R，采用 P r i m e r P r e mi e r 5软件进行 设计，设计后委托上海博尚生物公司合成。上游序列为 5 一 4 O卷 2 8期 吴 华等鸭 源大肠杆 菌氟苯尼考耐 药基 因flo R的流行调 查 1 3 8 2 9 C A C G T F G A G C C T C T A T A T 一 3 ，下游 序列 为 5 一 A q l G C A G A A G T AG A A C G C G 一 3 ，扩增的 目的片段为 8 6 8 b p。1 2 4 P C R扩增。总反应体系(共 5 0 1)：2T a q Ma s t e r Mi x酶 2 5 ，模 板 3 l，去 离 子水 2 0 t*l，引 物 F、R(2 5 li m o l tx 1)各 1 t*l。P C R反应条件：9 4预变性 2 rai n；9 4 变性 4 5 s，5 5 o C退火 4 5 s，7 2 o C延伸 1 mi n，共 3 2个循环；最 后 7 2延伸 5 m i n。1 2 5 测序及分析。P C R产物经 1 O 琼脂糖凝胶电泳，溴 化 乙锭染色，紫外投射仪下观察结果并用凝胶成像系统摄 像。阳性 P C R产物送华大基因测序，测序结果应用 D N A S T A R软件对序列进行分析。2 结果与分析 2 1 耐药表 型 根 据美 国 临床 实验 室标 准 化委 员 会(C L S I)标准判定分离菌的耐药性。由表 1 可知，2 2株鸭大 肠杆 菌对氟苯尼考和四环素全部耐药，耐药率达 1 0 0：1 5 株对多西环素耐药，3株中介，耐药率为 6 8 2 0；分别有 1 4、l 8、l 3、l 4、l 4株对庆大霉素、安普霉素、新霉素、阿米卡星、喹 乙醇耐药，耐药率分别为 6 3 6 0、8 1 8 0、5 9 0 0、6 3 6 0 和 6 3 6 0 ；2 2株全部对多粘菌素 E敏感。说明鸭大肠杆菌 对氟苯尼考、四环素类耐药较严重，氨基糖苷类次之，大部分 菌株呈多重耐药的特点。表 1 2 2株 鸭大肠杆菌耐药表型 2 2 flo R基因 P C R扩增结果与序列分析P C R结果显示，2 2 株鸭源大肠杆菌中有 2 0 株呈阳性结果，检测率为9 0 9，获 得与 目的片段大小一致 的片段(图 1)。未出现阳性结果的 2 株菌株与其耐药表型不一致，可能存在其他耐药机制，有待进 一步研究。测序的5株菌株基因序列一致，其基因序列与牛源 大肠杆菌(H Q 0 2 3 8 6 1 1)和鸡源大肠杆菌(H Q 0 2 3 8 6 3 1)同源性 对比分析，同源性分别为 1 0 0 和9 9。3 讨 论 氟苯尼考凭借其优 良的抗菌活性和较低的毒副作用及 对氯霉素耐药的菌株仍有良好的抗菌活性，自2 0世纪 9 0年 代以来在预防和控制细菌l生疾病中起了很大作用，但随着临 床用药量的增多以及不合理使用，临床上细菌对该药的耐药 性问题 日益严重。该研究分离的鸭源大肠杆菌对氟苯尼考 耐药率为 1 0 0，并呈现多重耐药特点。另外，在临床上应用 不多的多粘菌素 E对大肠杆菌仍有 良好的抗菌活性。氟苯尼考分子中以氟原子代替了氯霉素和甲砜霉素中 2 0 0 0 b p l 0 0 0 b p 7 5 0 b p 5 0 0 b D 2 5 0 b D 1 0 0 b D 注：M D L 2 0 0 0 D N A M a r k e r；1、2和 3 菌株。图1 代表菌株 P C R结果 都存在的丙烷链上 c 一 3位上的羟基，这种结构的不同使细菌 产生的乙酰基转移酶不能对氟苯尼考产生耐药性 J。但该 研究从沙门氏菌、大肠埃希菌等病原菌中克隆得到耐氟苯尼 考的耐药基因floR。o R基因的存在有助于同时对氯霉素和 氟苯尼考产生耐药性，其序列分析表明它和 C m l A基因存在 5 0 的同源性，进一步分析显示它可能是泵出蛋 白 MF超家 族的一员。临床对氟苯尼考耐药问题 日益突出，可能与氟苯尼考耐 药基因，2 水平传播有关。氟苯尼考耐药基因被报道可能 存在不同的遗传元件上，例如相关耐药基因定位在沙 门氏菌 染色体 的 S G I 1 基因岛上，存在大肠杆菌接合和非接合质粒 上，及在纽波特发现也存在大肠杆菌染色体上“。同时，在牛源大肠杆菌质粒上转座子上发现fl o R基因，表明这种插 入序列有 助 于flo R基 因在 不 同质粒 间 和染 色体 之 问传 播。这种转位过程已被证明是通过一个环形的中间体形 式出现。flo R基因的该转座过程与位点特异性转座的转座 子如 T n 5 5 4、T n 5 4 0 6和 T n 5 5 8非常相似，即产生一个环形的 中间体形式，在它们的左右结合位点没有反向重复序列的存 在。然而，已证明这种环形的中间体形式也许是一个同源性 重组的结果在插入序列 I S C R 2之间，其截断的形式位于floR 基因两侧。这种插入序列的存在在floR 基因传播的过程 中扮演着重要角色。参考文献 1 1于学辉，李旭玲，杨发龙，等 鸭源致病性大肠杆菌耐氟苯尼考flo R基 因的克隆与序列分析 J 中国畜牧兽医，2 0 1 0，3 7(3)：8 4 8 6 2 杜 向党，李新生，张素梅，等 鸡源大肠杆菌氟苯尼考耐药基 因flo R的 分子检i U J 河南农业大学学报，2 o 0 7，4 1(2)：1 8 81 9 1 3 何敏，卢胜明，李英伦 氯苯 尼考耐药 研究进展 J 中国兽药杂志，2 0 0 5，3 9(6)：3 8-4 1 4 1 K E Y E S K，HU D S O N C，MA U B Ett J J，e l a 1 D e t e c t i o n o f f l o r f e n i e o l r e s i s t a n e e g e n e s i n E s c h e r i c h i a c o l i i s o l a t e d f r o m s i c k c h i c k e n s J A n t i n fi e r o b A g e n t s Ch e mo t h e r，2 0 0 0，4 4：4 2 14 2 4 f 5 1 C 1 O C H A E R T A，B A U C H E R O N S，F L A U J A C G，e t a 1 P 1 a s m i d m e d i a t e d fl o r f e n i e o l r e s i s t a n c e e n c o d e d b y fl o R g e n e i n E c o l i i s o l a t e d f r o m c a t t l e f J A n t i m i e r o b A g e n t s C h e mo t h e r，2 0 0 0。4 4：2 8 5 8 2 8 6 O 6 郑朝朝，刘聚祥，李辉，等 鸡源、猪源 大肠杆菌氟苯尼考耐药基因flo R 的克隆与序列分析 J 华北农学报，201 0，2 5(5)：7 2 7 5 7 WH I T ED G，HU D S O N C，M U A E R R J J，e t a 1 C h a r a e t e r i z a t i o n o f c h l o r a n l n h e n j e o l a n d f l o ffe n i e o l r e s i s t a n c e i n E s h e e r i e h i a c o l i a s s o c i a t e d wh i t b o v i n e d i a r r h e a f J I J ai n Mi e r o b i o l，2 O O O，3 8：4 5 9 3 4 5 9 8 (下转 第 1 3 8 3 4页)l 3 8 3 4 安徽农业科学 2 0 l 2年 和 1 0 m g L低亚硝酸钠浓度 中染毒 9 6 h，其肝胰脏的 T A O C 水平有所升高，与对照组相 比，M D A含量平稳增加，但 差异不显著；在 2 0和 3 0 m#L处理组染 毒 9 6 h后，T A O C降至对照组以下，而 M D A含量却显著升高，表明肝胰脏 受到的氧化损伤程度加剧。戴伟等 研究发现，将罗非鱼(O r e o c h r o mi s n i l o t i c u s)暴露于不同铅含量水平(0、1 0 0、4 0 0和 8 0 0 g)的饲料中，随着饲料铅暴露剂量的增加，罗非鱼肝 胰脏中 M D A含量呈上升趋势。此外，郑清梅 等研究发 现，当草鱼经不同质量浓度 P h“处理，第 1 2 h时，其肝与鳃 的 MD A含量与对照组接近，但随着时间的延长，其肝与鳃的 MD A含量均明显高于对照组。以上研究结果表明，鱼体肝 脏 MD A含量变化对多种无机污染物的暴露 比较敏感，机体 在一定程度上能够调整抗氧化能力以避免因污染物暴露而 出现更大的氧化损伤，但 当暴露浓度超过一定范围时，机体 抗氧化系统要遏制更多的过氧化作用则显得无能为力。3 2 六价铬对草鱼谷胱甘肽硫转移酶活性的影响 谷胱 甘肽硫转移酶(G S T)作为生物体 内抗氧化防御体系的关键 酶之一，存在于所有的动物体 中，且在肝脏组织 中含量最为 丰富，其活性可依于污染物的胁迫而发生改变，因而，G S T活 性的变化可间接反映环境中氧化胁迫污染的程度，可作为环 境污染胁迫的检验指标。柏世军 研究发现，将罗非鱼鱼 种在 3 0 m g L的含 C d 水体暴露 1、5、1 0、2 0和 4 0 d后，其 肝胰脏 G S T活性在前 2 0 d暴露期间逐渐升高，随后显著降 低，但仍高于对照组。在该研究中，当 c r 6 浓度为7 2 3 m g L 时，草鱼肝胰脏 G S T活性受到轻微诱导，出现了一定的适应 性反应，随着 c 浓度的进一步增大，G S T活性则受到显著 抑制，这与上述已有研究较为一致。其原因可能是当草鱼暴 露于低浓度的 c r 溶液中时，诱导机体合成更多的G S T借以 消除外界污染物对 自身的损伤，随着 c r 6 浓度的增加，铬对 草鱼肝胰脏产生的毒性作用增强，一方面，诱导合成 的 G S T 代谢外源性污染物或者消除 H：O 的能力被饱和；另一方面，高浓度的C 可能直接埙害了 G S T的合成，使其浓度和活性 降低。参 考文献，1 WE B E R D N E x p o s u r e t o s u b l e t h a l l e v e l s o f w a t e r b o rne l e a d al t e r s r e p r o (上接第 1 3 8 2 9页)d u c t i v e b e h a v i o r p a t t e rns i n f a t h e a d m i n n o w s(P i m e p h a l e s p r o m e l a s)J N e u mt o x i c o l o g y，1 9 9 3，1 4(2 3)：3 4 7 3 5 8 2 A D E M A D M M D a p h n i a in a g n a a s a t e s t a n i m a l i n a c u t e and c h r o n i c t o x i c i ty t e s t s l J l _ H y d m b i o l o g i a，1 9 7 8，5 9(2)：1 2 51 3 4 3 D O U D O R O F F P B i o ass a y me t h o d s f o r t h e e v al u a t i o n o f a c u t e t o x i c i t y o f i n d u s t r i al w as t e s t o fi s h J S e w a g e a n d l n d u s tr al Wa s t e s，1 9 5 1，2 3(1 I)：1 3 8 o一1 3 9 7 4 MI C H E L S E，L E Y N E N N，C O U S Y N C，e t a 1 P h o t o t a c t i c b e h a v i o r o f D a p h-n i a a s a t o o l i n t h e c o n t i n u o u s mo n i t o rin g o f w a t e r q u ali t y：E x p e ri me n t s w i t h a p o s it i v e l y p h o t o ta c t i c D a p h n i a m a g n a c l o n e J Wa t e r R e s e a r c h，1 9 9 9，3 3(2)：4 0 1-4 0 8 5 陈亮，郭红岩，沈红，等 低浓度铅暴露对鲫鱼肝脏抗氧化系统的影响 J 环境科学，2 O O 2，2 1(5)：4 8 5 一 勰9 6 P A L A N I A P P A N P L R M，K A R T H I K E Y A N S B i o a c c u m u l a t i o n a n d d e p u r a t i o n o f c h r o mi u m i n t h e s e l e c t e d o r g a n s an d w h o l e b o d y t i s s u e s 0 ff r e s h wa t e r f i s h C i r r h i n u s mr ig a l a i n d i v i d u a l l y and i n b i n a r y s o l u t i o n s wit h n i c k e】J J E n v i r o n m e n t S c i e n c e，2 1 3 0 9，2 1(2)：2 2 9 2 3 6 7 WA T R A S C J MA C F A R L A N E J，MO R E L F M M N i c k e l a c c u m u l a t i o n b y S c e n e d e s mu s and D a p h n ia：F o o dc h a i n t r a n s p o r t and g e o c h e mi c a l i mp l i-c a t i o n s J C ana d i an J o u ma l o f F i s h e ri e s and A q u a t i c S c i e n c e s，1 9 8 5，4 2 (4)：7 2 4 7 3 0 8 吴贤汉，江新，张宝录，等 几种重金属对青岛文昌鱼的毒性及生长的 影响 J 海洋与湖泊，1 9 9 9，3 0(6)：6 0 4-6 0 8 9 廖自 基 微量元素的环境化学及生物效应 M 北京：中国环境科学出 版社，1 9 9 2：2 1 0 3 2 3 1 O 杨丽华，方展强，郑文彪 重金属对鲫鱼的急性毒性及安全浓度评价 J 华南师范大学学报：自然科学版，2 0 0 3，2(2)：1 0 41 0 6 1 1 王少博，王维民，郭亚楠，等 重金属镉和铬对草鱼苗的急生 和慢性毒 性效应 J 兰州大学学报：自然科学版，2 O O 7，4 3(4)：6 0 6 4 1 2 孔强，赵岩，付荣怒，3种重金属对孔雀鱼肝畦抗氧化酶系的影响 J 供水技术，2 0 1 0，4(6)：1 01 3 1 3 邱郁誊 水污染鱼类毒性试验方法 M 北京：中国环境科学出版社，1 9 9 2 1 4 O O S T R，B E Y E R J，V E R M E U L E N N P E F i s h b io a c c u m u l a t i o n and b i o-m a r k e r s i n e n v i r o n m e n t al r i s k ass e s s me n t：a r e v i e w J E n v i r o n me n t a l T o x i c o l o g y and P h a r m a c o l o gy，2 0 0 3，1 3(2)：5 7 1 4 9 1 5 D I G I U L L I O RT，H I N T O N D E T h e T o x i c o l o gy o f f i s h e s M B o c a R a-t o n F l o ri d a：C RC P r e s s 2 0 O 8：2 7 23 2 5 1 6 H U G G E T Y R J，K I ME R I E R A，ME HR I E M B i o m a r k e r s：b i och e m i c al，p h y s i o l o g i c al and h i s t o l o gi c al m ar k e rs o f a n t h r o p o g e n ic s t r e s s M B oca Ra t o n Ho rid a：L e wi s P u b l i s h e rs，1 9 9 2：2 3 53 3 5 1 7 谭树华，何典翼，严芳，等 亚硝酸钠对鲫鱼肝脏丙二醛含量和总抗氧 化能力的影响 J 农业环境科学学报，2 0 0 5，2 4(S I)：2 1 2 4 1 8 戴伟，金成官，傅玲琳，等 饲料铅暴露对罗非鱼肝胰脏抗氧化防御系 统及显微结构的影响 J 浙江大学学报：农业与生命科学版，2 0 O 9，3 5 (3)：3 5 0 3 5 4 1 9 郑清梅，郭江山，温茹淑，等 不同质量浓度铅对草鱼抗氧化性能的影 响 J 水产科学，2 0 1 0，2 9(1 1)：6 7 7 6 8 0 2 0 柏世军 水环境 鬲 对罗非鱼的毒性作用和机理探讨 D 杭州：浙江大 学，2 0 0 6 1 8 D A N I E L E ME U N I E R，E mc J O U Y，C O R I N N E L A z I Z Z E R A，e t a 1 P 1 as m i d b o rne fl o r f e n i c o l and e e fl i of u r r e s i s t anc e e r ic o d e d b y t h e fl o R a n d h l a C MY-2 n e s i n E s c h e r i c h ia c o l i s o l a t e s f r o m d i s e ase d c a tt l e in F r an c e J J o u r n a l o f Me d i c a Mi c rob i o l o g y，2 0 1 0，5 9：4 6 7 4 7 1 1 9 WE L c H T J，E v E N H U I S J，wH l T E D G。e t a 1 I n c A C p l asmid。me d i a t e d fl o ff e n i e o l r e s i s t anc e i n the c a t fi s h p a t h o g e n E d w a r d s ie l l a i c t a l u n J A n t i 而 c r o b Ag e n t s C h e mo t h e r，2 0 0 9 5 3：8 4 58 4 6 1 1 0 B O Y D D A，S H I X，H U Q H,e t a 1 S a l m o n e l l a g e n o m i c i s l and 1(S G I 1)，v a r i ant S GI l-I a n d n e w v a r ia n t S G I l 一 0 i n P r o t e u s mi r a b i l b c l i n i c a l a n d f o o d i s o l a t e s f r o m C h i n a J A n t i mic r o b A g e n t s C h e m o t h e r，2 O 0 8，5 2：3 4 0 3 4 4 1 1 MU L V E Y M R，B O Y D D A，O L S O N A B，e t a1 T h e g e n e t i c s o f S a l m o n e 1 1 a g e n o m i c i s l and 1 J M i c r o b e s I n f e c t，2 O 0 6 8：1 9 1 5 1 9 2 2 1 2 D O U B L E T B，S C H WA R Z S，K E H R E N B E R G C。e t a1 F 1 o r f e n i c o l r e s i s t a n t e g e n e fl o R i s p a r t o f a n o v e l t r a n s p o s o n J A n t i mic r o b A g e n t s C h e-mo t h e r，2 O O 5，4 9：2 1 0 6 2 l o 8 1 3 T O L E M A N M A，B E N N E T r P M，WA L s H T R I S C R e l e m e n t s：n O V e l g e n e c a p t u ri n g s y s t e m s o f t h e 2 1 s t c e n t u r y?J】Mi e r o b i o l Mo l B i o l R e v，2 0 0 6 7 0：2 9 63 1 6 1 4 杨微 大肠杆菌耐药h生均研究进展 J 畜牧与饲料科学，2 0 1 1，3 2(6)I l 61 I 8 1 5 L U O Y，K A N G J P，C HE N G J G，e t a 1 D e v e l o p m e n t o f a m u h i v al e n t i n a c-t i v a t e d v a c c i n e ag a i n s t p a t h o g e n i c E s c h e r i c h i a c o l i i n f e c t i o n i n f o r e s t mu s k d e e r J A g n c u l t u r al S c i e n c eT e c h n o l o gy，2 0 1 0，1 1(91 O)：9 7 1 0 0 1 6 吕点点，李先磊，刘立超，等 猪源h生 大肠杆菌的分离鉴定及耐药 式 验 J 畜牧与饲料科学，2 0 0 9，3 0(3)：1 3 0