浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号：08实验时间：7月18日8:30－17:00请勿透露学校、教师和个人信息人脐静脉内皮细胞复苏【实验结果】倒置显微镜下观察，刚复苏后的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）形态呈圆形，清晰可见，悬浮在培养液中（图1）。复苏6h后镜下观察，细胞还未贴壁（图2）。图1刚复苏后的HUVEC（×100）图2复苏6h后的HUVEC（×200）【讨论】7月14日细胞传代后，由于当时胰酶消化时间没掌握好，导致传代出来的细胞较少，传出来的2瓶细胞均生长缓慢。且经3天培养，培养瓶中出现较多杂质，因此重新复苏1瓶细胞。细胞复苏4-6h后，细胞大都开始贴壁，但是本次实验细胞复苏后经6h培养，镜下仍未见细胞贴壁。考虑可能是因为我们的实验操作还未娴熟，细胞从液氮取出后解冻时间过长，导致冻存液（DMSO）造成细胞损伤，使细胞复苏失败。另外，培养液中杂质较多，考虑可能是国产胎牛血清质量不好，因此换用Gibco血清，并把所有的玻璃器皿和离心管等耗材重新高压灭菌。
