浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:32实验时间:8月11日13:30-19:30请勿透露学校、教师和个人信息大鼠心肌组织总RNA提取【实验结果】本次试验通过ND2000检测提取的大鼠心肌组织总RNA浓度及纯度,具体如表1所示:表1大鼠心肌组织RNA浓度组别RNA浓度(ng/μL)A260A280A260/280A260/230正常组1386.29.5575.1421.8612409.610.245.4941.960.95模型组1426.610.6655.5971.910.972395.49.8865.1081.941.25OPJ1-1001528.713.2176.7811.951.372342.18.5524.511.90.79OPJ1-3001689.217.2298.7451.971.7240610.155.1881.961.45普萘洛尔组1870.221.75510.9171.991.542605.915.1477.8181.941.08注:普萘洛尔组:阳性对照组;OPJ1-100:麦冬多糖100mg/kg组;OPJ1-300:麦冬多糖300mg/kg组A260/280nm波长处吸光度值;A260/230nm波长处吸光度值【实验讨论】组织RNA抽提要避免RNA的降解和组织内杂质的残留,由于组织中含有RNA酶,因此避免RNA降解是首要问题,而心肌组织富含RNA酶,在抽提过程中避免内源性RNA酶降解的污染至关重要。尽管Trizol试剂作为一种强力的蛋白质变性剂,但它不能完全抑制RNA酶活性。液氮研磨法是目前较为常用的方法,具有操作简便,结果稳定,易于开展等优点,且昨天的预实验效果理想,因此本次抽提采用液氮研磨进行心肌组织总RNA抽提,检测RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的,我们只看OD260/OD280(Ratio,R)。R在1.8~2.0时,认为RNA中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容忍的。当R>2.2时,说明RNA已经水解成单核酸。本实验结果可以看出,各组OD260/0D280均在1.8~2.0之间,说明纯度较高(如表1所示),因此,认为此次抽提RNA成功。