浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:16实验时间:7月26日8:30-17:00请勿透露学校、教师和个人信息MTT法检测双氧水损伤的抑制实验【实验结果】表1不同双氧水浓度对人脐静脉内皮细胞的影响图2不同双氧水浓度对人脐静脉内皮细胞的影响【讨论】本次实验数据与理论情况有误差,初步判断本次试验失败,分析原因如下:1.双氧水的稀释程度大,将近稀释100000倍,稀释过程中如果没有充分混匀将会导致巨大误差,我组成员将进一步讨论并选出更加合适的稀释方案。2.我组用的96孔板并不是严格无菌的,有些空有少量纤维状杂质,可能导致误差。【注意事项】1.在理想的MTT实验中,如果是细胞抑制实验,不加药物处理的空白组的吸收值应该在0.8-1.2左右,太小检测误差占的比例较多,太大吸收值可能已经超出线性范围。这个原理在朗伯-比尔定律中有解释。2.加入MTT后若有个别孔立即变为蓝黑色,则污染的可能性極大。在加MTT前可以先在镜下观察,看看是否有孔染菌,染菌的孔常常是临近的。双氧水浓度(μmol/L)吸光度(OD值)生长抑制率00.153±0.0040%2000.149±0.00810.2%2500.152±0.0083.27%3000.148±0.00910.6%3500.156±0.005-7.14%4000.152±0.0052.04%