浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号：03实验时间：7月13日9:30－10:30请勿透露学校、教师和个人信息人脐静脉内皮细胞换液实验【实验结果】细胞复苏后培养24h，可见培养液呈浅红色，镜下可见少许细胞碎片及漂浮细胞（图1）。换液后，培养液呈红色。在倒置显微镜下观察，细胞形态不规则，生长状况良好，贴壁明显，悬浮细胞和死细胞较少（图2）。图1细胞换液前的HUVECs（×100）图2细胞换液后的HUVECs（×100）【讨论】换液前用PBS清洗1次是为了去除贴壁不良的细胞和一些细胞碎片。图中可见，经细胞换液后，镜下细胞培养瓶内壁更加干净，悬浮细胞和碎片明显减少。细胞分布均匀。【注意事项】一、无孔培养瓶在放入培养箱之前应将瓶盖拧松，迅速放入培养箱中，并将瓶口朝里。二、无菌操作的注意事项：1.操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精擦拭。试剂等瓶口也要擦拭。2.点燃酒精灯，操作在火焰附近进行。5.瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。三、无菌室内的操作要求和注意事项：1.凡是带入无菌室的试剂（酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶等）的瓶子均要用75％酒精擦拭瓶子的外表面。2.吸管不能碰到废液缸、手。3.吸取两种以上的试剂时要注意更换吸管，防止交叉污染。4.不同细胞培养瓶（板）内使用的吸管要注意更换，防止污染扩大。
