2型糖尿病大鼠模型的建立高糖高脂饮食联合低剂量链脲佐菌素(StreptozocinSTZ)的模型制备方法1.实验材料1.1实验动物清洁级雄性Wistar大鼠(200±20g),需要有实验动物使用许可证,常规饲料灭菌,高糖高脂饲料,自由饮水采食,光照12h/12h定时明暗交替,湿度55±5%1.2实验试剂链脲佐菌素(STZ)、高糖高脂饲料、柠檬酸钠缓冲液(PH4.5)、精蛋白生物合成人胰岛素、生理盐水、20%葡萄糖溶液。解螺旋http://www.helixlife.cn/1.3实验仪器血糖仪、血糖试纸、天平秤、纯水机。1.4部分实验试剂的配制2%STZ:按照当天给药大鼠的体重和数量确定2%STZ溶液的总量,按照20mgSTZ粉末溶于1ml柠檬酸钠缓冲液的比例,现用现配。2.实验方法大鼠T2DM模型的制备(1)选取体重200±20g健康雄性Wistar大鼠,实验前检测空腹血糖(Fastingplasmaglucose,FPG<7.0mmol/L者入选实验,若干只。(2)实验前,对健康大鼠进行编号,并适应性饲养1w。适应性饲养结束前,检测大鼠FPG、空腹血清胰岛素(Fastinginsulin,FINS),计算胰岛素敏感性指数(Insulinsensitivityindex,ISI)和进行腹腔注射糖耐量试验(i.p.glucosetolerancetest,IPGTT)(3)适应性饲喂结束后,采用高糖髙脂饲料连续饲养4w,期间自由饮水采食。高糖高脂饲料饲喂结束前,检测大鼠FPG、FINS,计算ISI,进行IPGTT实验。(4)高糖高脂饲料饲喂结束后,在空腹状态下,按照大鼠体重一次性腹腔注射30mg/kg2%STZ,72h内监测随机血糖,随机血糖值≥30.0mmol/L者腹腔注射胰岛素1-2U/kg,血糖值过低(尤其出现精神萎靡症状)注射葡萄糖溶液。1w后检测FPG,空腹血糖≥7.0mmol/L即为成功T2DM模型。保留成功模型,淘汰失败模型。成功模型检测FPG、FINS,计算ISI。3.应用实例文献1.OzaMJ,KulkarniYA.BiochaninAimprovesinsulinsensitivityandcontrolshyperglycemiaintype2diabetes.BiomedPharmacother2018;107:1119-27.2.周鹏飞.2型糖尿病大鼠模型的建立及其胰腺组织INS和PDX-1表达变化的初步研究[D].扬州大学,2018.解螺旋http://www.helixlife.cn/