浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:48实验时间:8月29日8:30-17:00请勿透露学校、教师和个人信息麦冬多糖对HUVEC细胞内SOD酶活力影响(3)【实验结果】1.BCA测蛋白质浓度结果经BCA蛋白浓度测定试剂盒检测蛋白质浓度,在562nm波长下测得吸光度与,得到蛋白质标准曲线(图1),再根据标准曲线求出样品蛋白质含量(表1)。图1蛋白质标准曲线表1HUVEC细胞内蛋白质浓度组别蛋白质含量μg/mL正常组1045.6模型组516.6OJP1-25354.6OJP1-50649.6OJP1-100644.6OJP1-200609.6注:OJP1-25:麦冬多糖25μg/mL组;OJP1-50:麦冬多糖50μg/mL组;OJP1-100:麦冬多糖100μg/mL组;OJP1-200:麦冬多糖200μg/mL组。2.SOD试剂盒检测结果依据SOD活力计算公式进行SOD活力计算:a)抑制百分率的计算:抑制百分率=[(A空白对照1-A空白对照2)-(A样品-A空白对照3)]/(A浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:48实验时间:8月29日8:30-17:00请勿透露学校、教师和个人信息空白对照1-A空白对照2)×100%b)SOD酶活力的计算:待测样品中SOD酶活力单位=检测体系中SOD酶活力单位=抑制百分率/(1-抑制百分率)unitsc)根据样品的蛋白浓度和稀释倍数,将SOD活力单位换算为U/mg蛋白进行SOD活力计算。经SPSS19.0软件分析,结果显示:与正常对照组相比,模型组细胞内SOD值显著下降,统计学分析有极显著性差异(P<0.01);与模型组相比,OJP1-25组、OJP1-50组、OJP1-100组和OJP1-200组细胞内SOD值均有升高,统计学分析有极显著性差异(P<0.01)(表2图2)。表2OJP1对细胞内SOD活力的影响(sx,n=3)组别SOD活力(U/mg蛋白)对照组37.987±2.171模型组12.525±0.695##OJP1-25组62.551±3.301**OJP1-50组20.899±1.704**OJP1-100组31.538±1.300**OJP1-200组28.881±1.752**注:##:与正常组比较P<0.01);**:与模型组比较P<0.01。OJP1-25:麦冬多糖25μg/mL组;OJP1-50:麦冬多糖50μg/mL组;OJP1-100:麦冬多糖100μg/mL组;OJP1-200:麦冬多糖200μg/mL组。浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:48实验时间:8月29日8:30-17:00请勿透露学校、教师和个人信息图1OJP1对细胞内SOD值的影响(sx,n=3)【实验讨论】SOD是一种源于生命体的活性物质,能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。本实验所用试剂盒测定SOD方法为黄嘌呤氧化酶法。结果表明:模型组较正常组的SOD浓度降低,有显著性差异,说明造模成功。给药组较模型组有明显提高,有显著性差异,说明麦冬多糖能使细胞内SOD浓度增高,改善细胞氧化受损状况,具有一定抗心肌缺血的作用。