浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号：04实验时间：7月14日9:00－16:00请勿透露学校、教师和个人信息人脐静脉内皮细胞传代培养【实验结果】倒置显微镜下观察到细胞长满屏壁，呈铺路石状镶嵌排列，细胞密集，有些许死细胞和悬浮细胞（图1），因此判断可以传代。经传代后4h镜下观察，可见部分细胞开始贴壁生长，但细胞数量较少（图2）。图1细胞传代前的HUVEC（x100）图2细胞传代4h的HUVEC(x100)【讨论】镜下发现传代出来细胞数较少，分析原因如下：由于第一次做传代实验，对于胰酶消化时间掌握不好，可能是由于消化时间过短，大部分细胞仍贴壁，不能被吹打下来，导致传代的细胞数目较少；也可能是消化时间过长，大部分细胞脱落后被弃去，留下的传代细胞较少。因此，下次传代应严格掌握胰酶消化时间，消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶。【注意事项】1.适度消化：消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响，消化过程中应该注意培养细胞形态的变化，一旦胞质回缩，连接变松散，或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。2.传代过程中需要使用滴管将培养瓶底部已消化的细胞吹打成细胞悬液，操作过程注意吹打力度，避免产生气泡。
