第十一章荧光分析法2233概述一、分子发光分析法及其分类某些物质的分子吸收一定能量后,电子从基态跃迁到激发态,以光辐射的形式从激发态回到基态,这种现象称为分子发光,在此基础上建立起来的分析方法为分子发光分析法较高激发态基态吸收能量受激光辐射退激分子在退激过程中以光辐射形式释放能量44根据分子受激时所吸收能源及辐射光的机理不同分根据分子受激时所吸收能源及辐射光的机理不同分为以下几类:为以下几类:光致发光:以光致发光:以光源光源来激发而发光来激发而发光电致发光:以电致发光:以电能电能来激发而发光—原子发射光谱法来激发而发光—原子发射光谱法生物发光:以生物发光:以生物体释放的能量生物体释放的能量激发而发光激发而发光((研究研究热点)热点)化学发光:以化学发光:以化学反应能化学反应能激发而发光—化学发光分激发而发光—化学发光分析法析法荧光—荧光分析法磷光—磷光分析法55灯笼蘑菇灯笼蘑菇发光虫发光虫警报水母警报水母腰鞭毛虫萤火虫萤火虫夏威夷短尾乌贼叶状栉水母冷光扇菇66二、分子荧光分析法的特点二、分子荧光分析法的特点1.1.灵敏度高灵敏度高荧光强度随激发光强度增强而增强(提高激发荧光强度随激发光强度增强而增强(提高激发光强度,可提高荧光强度光强度,可提高荧光强度采用高灵敏度的检测系统可大大提高灵敏度,检测限荧光分析法比分光光度法低2~4个数量级激发发射荧光强强激发光物质激发光物质772.2.选择性好选择性好不同的物质用不同的光进行激发,选择不同的激发光波长不同的物质用不同的光进行激发,选择不同的激发光波长不同的物质发射的荧光不同,选择不同的检测荧光波长不同的物质发射的荧光不同,选择不同的检测荧光波长比较容易排除其它物质的干扰,选择性好比较容易排除其它物质的干扰,选择性好3.3.实验方法简单实验方法简单4.4.待测样品用量少;仪器价格适中;测定范围较广待测样品用量少;仪器价格适中;测定范围较广具发光强度可定量测定许多痕量的无机物和有机物,广泛应具发光强度可定量测定许多痕量的无机物和有机物,广泛应用在生物化学、分子生物学、免疫学及农牧产品分析、卫生用在生物化学、分子生物学、免疫学及农牧产品分析、卫生检疫等领域。检疫等领域。荧光法比磷光法应用广泛,不如分光光度法荧光法比磷光法应用广泛,不如分光光度法88第一节荧光分析法的基本原理一、分子荧光的产生在单重激发态中,两个电子平行自旋,单重态分子具有抗磁性,...