基因工程董燕广州中医药大学临床药理研究所免疫研究室与分子生物学技术实验室年份1970197219741975～19771977197819811982198919901990-19921994199720002003重要事件H.O.Smith等人分离到第一种限制性核酸内切酶Cohen和Boyer等人得到第一个重组DNA分子首次实现了异源真核生物的基因在大肠杆菌中的表达F.Sanger等人发明了DNA序列快速测定技术首次在大肠杆菌中表达生长激素抑制素基因在大肠杆菌中表达人胰岛素基因获得第一个转基因小鼠第一个基因工程药物——胰岛素在美国和英国获准使用美国联邦专利局开始接收基因工程植物和基因工程动物方面的专利申请人类基因组计划开始实施第一个转基因玉米及转基因小麦诞生基因工程西红柿在美国上市英国罗斯林研究所应用转基因技术首次育成克隆羊人类基因组计划DNA测序草图完成人类基因组计划完成全部测序工作基因工程研究重要事件基因工程在医学中的应用举例1.基因工程药物干扰素——治疗病毒性感染和肿瘤全血中105U/L基因工程产物1022U/L发酵液人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)——溶血栓药物在人、动物组织中含量极微乙肝病毒疫苗——克隆和表达表面抗原基因具有更高的安全性2.基因工程抗体鼠源单抗人源化——减少或消除作为异源蛋白诱发的人抗鼠抗体制备小分子抗体Fab、单链抗体等制备抗体融合蛋白——导向治疗，如毒素、酶、细胞因子3.基因工程疫苗（核酸疫苗）去除毒力相关基因使丧失致病性，但保留免疫原性，构建重组质粒，在宿主体内表达，可激发长期而有效的免疫应答。无减毒、灭活疫苗可能引起的致病性4.基因治疗概念：其主要内容是基因的分离、合成、切割和连接（重组）、转移和扩增，所以又称为基因克隆、分子克隆或重组DNA技术。克隆（cloing）指从一个共同祖先经无性繁殖所产生的在遗传上同一的DNA分子、细胞或个体所组成的群体。重组DNA技术：指通过体外将特定基因和载体构建重组DNA分子，并导入受体细胞，使其扩增并获得大量同一DNA分子的过程。基因工程（geneengineering）：利用DNA克隆技术获取大量DNA分子，或利用克隆基因表达、制备特定蛋白质和多肽产物的技术和相关工作的统称。获得目的基因片段构建重组载体转化、转染筛选诱导表达扩增产物的鉴定分离纯化目的基因与载体的拼接将重组DNA导入受体利用选择标记获得重组DNA分子的寄主细胞克隆基因工程基本路线第一节基因工程常用的工具酶一．限制性核酸内切酶又称限制酶(restrictionendonuclease)，是一类能够识别双...
