第四章电泳技术Electrophoresis1内容提纲凝胶电泳电泳技术概论3132常用电泳技术2一、定义一、定义电泳：电泳：带电粒子在直流电场中向着与其本身所带电荷电性相反的电极移动的现象。第一节电泳技术概论第一节电泳技术概论3二、电泳的基本原理二、电泳的基本原理悬浮或溶解在电解质溶液中的带电粒子，在电悬浮或溶解在电解质溶液中的带电粒子，在电场作用下以不同的速度向着与自身所带电荷极性相场作用下以不同的速度向着与自身所带电荷极性相反的电极移动。在电泳过程中，带正电荷的粒子向反的电极移动。在电泳过程中，带正电荷的粒子向电场的负极方向移动，带负电荷的粒子向电场的正电场的负极方向移动，带负电荷的粒子向电场的正极方向移动。移动的带电粒子受到电场力和周围介极方向移动。移动的带电粒子受到电场力和周围介质阻力的作用，当二力平衡时，粒子以稳定的速度质阻力的作用，当二力平衡时，粒子以稳定的速度向电极方向移动。向电极方向移动。由于电荷、质量等的差异，粒子将会有不同的质/荷比，使其在电场中具有不同的迁移速度。4基本原理基本原理（（qq：有效电荷，：有效电荷，EE：电场强：电场强度）度）F1=EqF1=Eq电场力：电场力：F2=6F2=6rrvvFF22：摩擦阻力：摩擦阻力vv：在介质粘度：在介质粘度ηη中半径为中半径为rr的颗粒的移动速度的颗粒的移动速度rr：球形粒子的半径：球形粒子的半径ηη：介质黏度：介质黏度阻力：阻力：5VVqqMM=———=————=———=————EE66rrEqEqv=————v=————66rrEq=6Eq=6rrvvF1=F2F1=F2迁移率迁移率（（Mobility)Mobility)————带电颗粒在单位电场强度带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度。下的泳动速度。6三、影响电泳速度的因素三、影响电泳速度的因素1.1.电场强度（电场强度（EE））E↑→E↑→电流↑→热效应→支持介质上的水分蒸发电流↑→热效应→支持介质上的水分蒸发→样品的热变性→样品的热变性E↓→E↓→电泳速度慢→延长电泳时间→样品扩散电泳速度慢→延长电泳时间→样品扩散→区带模糊不清→分辨率下降→区带模糊不清→分辨率下降7电场强度愈高，带电粒子受到的电场力就愈大，粒子移动速度愈快溶液的溶液的II越高，带电粒子的泳动速度越慢，越高，带电粒子的泳动速度越慢，但区带分离度却较清晰。但区带分离度却较清晰。I↑→缓冲能力越大→缓冲液所载的分电流增加，而样品所载的电流相应减少→电泳速度减慢22..缓冲液缓冲液...
