「公众号：医学生考研」生物化学：蛋白质易漏知识点小三门以记忆内容居多，而且出题越来越细，很多小的知识点会被忽略但往往会成为考题。真题回顾：一、（2015N25A）使血清蛋白（pI为4.7）带正电荷的溶液pH是A.4.0B.5.0C.6.0D.7.0二、（2011N25A）盐析法沉淀蛋白质的原理是A.改变蛋白质的一级结构B.使蛋白质变性，破坏空间结构C.使蛋白质的等电点发生变化D.中和蛋白质表面的电荷并破坏水化膜三、（2009N26A）蛋白质变性后的主要表现是A.相对分子质量变小B.黏度降低C.溶解度降低D.不易被蛋白酶水解解析：一、A。蛋白质有两性电离的特性：若溶液pH〈pI，蛋白质带正电荷；若溶液pH〉pI，蛋白质带负电荷；若pH=pI，为兼性离子，电荷为0.本题中白蛋白的pI为4.7，则在pH=4.0的溶液中带正电荷。二、D.盐析法是将硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液中，使其表面电荷中和以及水化膜被破坏，导致蛋白质在水溶液中的稳定因素去除而沉淀。三、C。蛋白质的变性主要发生二硫键和非共价键的破坏，不「公众号：医学生考研」涉及一级结构的改变，故分子量不会变小。蛋白质变性后的主要表现是溶解度降低、粘度增加、结晶能力消失、生物学活性丧失、易被蛋白酶水解。大纲考点：蛋白质的理化性质；分离、纯化蛋白质的一般原理和方法知识点详解：一、两性解离的性质当蛋白质溶液处于某一pH时蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即为兼性离子，净电荷为0，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点（pI）。溶液的pH大于某一蛋白质的等电点时，该蛋白质颗粒带负电荷，反之则带正电荷。人体内蛋白质等电点大多接近5.0.二、紫外吸收蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸，因此在280nm波长处有特征性吸收峰。在此波长范围内，蛋白质的A280与其浓度成正比关系，因此可进行蛋白质定量测定。核酸的嘌呤环和嘧啶环的最大吸收峰在260nm附近三、呈色反应1.茚三酮反应：氨基酸与茚三酮水合物共加热，最终形成蓝紫色化合物，其最大吸收峰在570nm，利用此原理行氨基酸定量分析。注意：蛋白质经水解后产生的氨基酸可发生茚三酮反应而非蛋白质。2.双缩脲反应：蛋白质和多肽分子中的肽键在稀碱溶液中与硫「公众号：医学生考研」酸铜共热，呈现紫色或红色。注意：氨基酸不会出现此反应，当蛋白质溶液中蛋白质的水解不断增多时，氨基酸浓度上升，其双缩脲橙色的深度就逐渐下降。双缩脲反应可检测蛋白质的水解程度。四、胶体性质蛋白质表面大多为亲水基团可吸引水分子使颗粒表面形成一层水化...
