6期·1829·谷氨酸通过T1R1/T1R3-ERK1/2通路调节香猪睾丸间质细胞自噬相关基因表达王涵，徐永健，蒙利洁，龚婷*（贵州大学动物科学学院/高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室，贵州贵阳550025）摘要：【目的】探究L-谷氨酸刺激对香猪睾丸间质细胞自噬的影响，为进一步研究味觉受体T1R1/T1R3通过雷帕霉素靶蛋白（mTOR）调控下自噬对雄性生殖的影响提供理论依据。【方法】选取30日龄的健康从江香猪分离培养睾丸间质细胞，采用不同浓度L-谷氨酸刺激睾丸间质细胞T1R1/T1R3，探究激活T1R1/T1R3对睾丸间质细胞自噬相关基因（TAS1R1、TAS1R3、ERK1、ERK2、mTOR、Beclin1和MAP1LC3B）表达的影响。【结果】从江香猪睾丸间质细胞在培养72~96h增殖最快，于培养96h时达对数生长期。10mmol/L是L-谷氨酸刺激睾丸间质细胞味觉受体T1R1/T1R3的有效浓度。经10mmol/L的L-谷氨酸刺激后，睾丸间质细胞的mTOR、ERK1和ERK2基因相对表达量极显著高于对照组（P<0.01，下同），而Beclin1基因相对表达量极显著低于对照组，MAP1LC3B基因相对表达量显著低于对照组（P<0.05，下同）；ERK1/2和p-S6K1蛋白相对表达量显著高于对照组，而Beclin1蛋白相对表达量显著低于对照组。单丹磺尸酰胺（MDC）染色结果显示，经10mmol/L的L-谷氨酸刺激后，睾丸间质细胞内的酸性自噬泡荧光强度明显低于对照组，表明胞内自噬受抑制。【结论】10mmol/L的L-谷氨酸可激活从江香猪睾丸间质细胞T1R1/T1R3，且自噬相关基因TAS1R1、TAS1R3、ERK1、ERK2和mTOR及相关蛋白T1R1、T1R3、ERK1/2、p-S6K1和p-mTOR表达升高，而Beclin1和MAP1LC3B基因及Beclin1蛋白表达降低，故推测谷氨酸可通过激活味觉受体T1R1/T1R3参与雄性生殖自噬的负调控。关键词：从江香猪；睾丸间质细胞；味觉受体T1R1/T1R3；自噬；谷氨酸中图分类号：S828.89文献标志码：A文章编号：2095-1191（2023）06-1829-08收稿日期：2022-09-05基金项目：国家自然科学基金项目（31702117）；贵州省科学技术项目（黔科合基础〔2020〕1Y135号，黔科合基础〔2018〕1404号）通讯作者：龚婷（1990-），https://orcid.org/0000-0003-3624-7972，博士，副教授，主要从事动物遗传育种与繁殖研究工作，E-mail：tgong@gzu.edu.cn第一作者：王涵（1998-），https://orcid.org/0000-0002-6848-8124，研究方向为动物遗传育种与繁殖，E-mail：3021585823@qq.com南方农业学报JournalofSouthernAgriculture2023，54（6）：1...
