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骨抑素对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、成骨分化和促进血管生成能力的影响.pdfVIP免费

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·316·骨抑素对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、成骨分化和促进血管生成能力的影响付生龙",张军",刘俊朋,曹吉烈11济南市第五人民医院骨科,250022济南;2空军军医大学空军特色医学中心骨科,100142北京通信作者:曹吉烈,E-mail:caojilie2727@163.com[摘要】目的探讨骨抑素(osteostatin,OST)对缺氧环境下骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs)增殖、成骨分化和促进血管生成能力的影响及其在骨缺损修复中的应用前景。方法从大鼠骨髓中分离培养BMSCs。BMSCs经OST处理后,在常氧(21%氧气)或缺氧(1%氧气)条件下培养。采用cellcountingkit-8(CCK-8)法检测细胞增殖,台盼蓝染色法检测细胞死亡率。通过碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)染色和茜素红S(alizarinredS,ARS)染色评价成骨分化。westernblot检测ALP、成骨转录因子(runt-relatedtranscriptionfactor2,RUNX2)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的蛋白水平。ELISA检测培养基中血管生成素1(angiopoietin-1,Ang-1)和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)浓度。小管形成试验评估促进血管生成能力。结果OST剂量依赖性增强大鼠BMSCs的增殖(F=4.89,P=0.006)。缺氧诱导下,BMSCs的增殖、小管形成量增加(F=28.98、76.68,P均<0.001),Ang-1和VEGF的浓度提高(F=183.7、585.6,P均<0.001);ALP、RUNX2和OCN的蛋白水平降低(F=646.8、432.7、257.5,P均<0.001)。OST处理后,BMSCs增殖(常氧+OSTvs常氧,P均<0.001缺氧+OSTvs缺氧,P=0.005)、小管形成量(常氧+OSTvs常氧,P=0.002;缺氧+OSTvs缺氧,P=0.005)进一步增加,Ang-1浓度(常氧+OSTvs常氧,P<0.001;缺氧+OSTvs缺氧,P<0.001)和VEGF的浓度(常氧+OSTvs常氧,P<0.001;缺氧+OSTvs缺氧,P<0.001)进一步提高;ALP、RUNX2和OCN的蛋白水平升高(常氧+OSTvs常氧,P均<0.001,缺氧+OSTvs缺氧,P均<0.001)。结论OST可增强缺氧环境中BMSCs的增殖和成骨分化能力,促进血管生成。[关键词]骨抑素;骨髓间充质干细胞;成骨分化;血管生成;缺氧[中图分类号]R681基金项目:山东省医药卫生科技发展计划项目(2019WS065)DOI:10.3969/j.issn.2097-1753.2023.04.007Effectsofostestatinonproliferation,osteogenicdifferentiationandangiogenicabilityofbonemarrowmesenchymalstemcellsFUShenglong,ZHANGJun',LIUJunpeng,CAOJilie'DepartmentofOrthopedics,JinanFifthPeople'sHospital,Jinan...

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