临床医学检验技师考试辅导《临床免疫学和免疫检验》第三章免疫原和抗血清的制备第一节免疫原的制备第二节免疫佐剂第三节抗血清的制备第四节抗血清的鉴定和保存第五节抗血清的纯化第一节免疫原的制备免疫原指能诱导机体产生抗体或致敏淋巴细胞，并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。免疫原相当于抗原。一、颗粒性抗原的制备颗粒性抗原：各种细胞、细菌、寄生虫。1.细胞抗原（如绵羊红细胞）一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净，配制一定浓度即可。2.细菌抗原多用液体或固体培养物，经集菌后处理。颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法，较少加佐剂作皮内注射。二、可溶性抗原的制备和纯化（一）可溶性抗原的制备蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶、补体、细菌毒素、免疫球蛋白片段、核酸等皆为良好的可溶性抗原，免疫前常需提取和纯化。1.组织细胞抗原的制备细胞破碎方法有：（1）高速组织捣碎机法。（2）研磨法，可用组织匀浆器或乳钵。2.组织细胞或培养细胞可溶性抗原制备第一步单个细胞获得的方法（1）机械捣碎（2）酶处理法，常用胃蛋白酶或胰酶第二步细胞破碎方法有：（1）反复冻融法（2）超声破碎法（3）自溶法（4）酶处理法，常用溶菌酶、蜗牛酶、纤维素酶（5）表面活性剂处理法3.免疫球蛋白片段的制备五种免疫球蛋白都具抗原性，皆可提取及纯化，但如分解成片段（如Fab片段、Fc片段、轻链片段等）作为免疫原可制备出分辨力更高的特异性抗血清。（1）非共价键解离法（2）共价键解离法第1页临床医学检验技师考试辅导《临床免疫学和免疫检验》（3）溴化氰裂解法（4）酶解法1）木瓜酶可将IgG裂解成2个Fab片段及1个Fc片段。2）胃蛋白酶可将IgG裂解成F（ab’）2片段及数个小片段。3）胰蛋白酶可将IgG切成不规则的肽链。（二）可溶性抗原的纯化1.超速离心法仅适用于少数大分子抗原及一些比重较轻的抗原，而不适用于大多数中小分子抗原。2.选择性沉淀法（1）核酸去除法可采用氯化锰、硫酸提取鱼精蛋白等核酸提取沉淀剂。核糖核酸降解法更简便（采用DNA或RNA酶）。（2）盐析法常采用硫酸铵使蛋白抗原进行粗筛、提取丙种球蛋白及抗原浓缩。（3）有机溶剂沉淀法常采用乙醇或丙酮。（4）聚合物沉淀法常用非离子型聚合物，如分子量为2000～6000的聚乙二醇（PEG）。3.凝胶过滤法又叫分子筛层析。通过凝胶分子筛作用，可将大、中、小三类分子分开，选择凝胶柱时应注意选用适于分离范围内的凝胶。4.离子交换层析法离子交换层析是利用一些带电离子...
