临床医学检验技师考试辅导《临床免疫学和免疫检验》第十六章细胞因子与细胞黏附因子的测定第一节生物学测定方法常见的生物学测定法包括：基于DNA检测的分子生物学测定法和生物活性测定法。前者有细胞因子或细胞黏附分子DNA扩增法、RNA印迹法、原位杂交法、核酸酶保护分析等，可定性或定量分析细胞因子和细胞黏附分子的基因或mRNA。后者则是根据细胞因子特定的生物活性而设计的检测方法，主要用于细胞因子的测定。生物活性测定法的基本原理，是根据不同细胞因子所具有的某一方面独特的生物学活性，构建发挥这一活性的反应体系，通过观察其活性作用的结果，判断有无相应细胞因子的存在。有助于细胞因子检测的活性作用大致有以下几类：1.刺激细胞增殖或集落形成的活性；2.维持细胞生长和存活的特性；3.抑制细胞生长或破坏细胞的效应；4.促进细胞趋化或抗病毒作用等。一、促进细胞增殖和抑制细胞增殖测定法1.直接计数法2.细胞代谢活性测定方法3.细胞代谢产物测定法常用放射性核素掺入法和MTT比色法二、细胞毒活性测定法对指示细胞具有破坏作用的细胞因子，若与细胞共育将会导致细胞死亡。因此，待测细胞因子做一系列稀释后加至指示细胞培养体系，以检测培养细胞的死细胞数作为判断指标，死细胞数量与细胞因子的活性成正比。本法常用于TNF等的测定。三、抗病毒活性测定法抗病毒活性测定法主要用于IFN等细胞因子的检测。四、趋化活性测定法其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性可采用琼脂糖和Boyden盲端微孔小室趋化试验测定。化学增活性可采用琼脂糖小滴化学动力学试验测定。五、生物学活性测定方法学评价细胞因子生物学活性测定法主要具有以下特点：1.敏感性较高2.特异性不高3.操作繁琐第1页临床医学检验技师考试辅导《临床免疫学和免疫检验》4.易受干扰第二节免疫测定方法一、ELISA方法双抗体夹心法是用于细胞因子测定的最常用方法。细胞因子测定的标本主要包括两大类，一是血清（血浆）、关节液、胸腔液、脑脊液或腹腔液等体液，可用于细胞因子和可溶性黏附分子的检测；二是细胞体外培养后的培养上清液，只用于细胞因子的检测。二、流式细胞分析法流式细胞分析法，是基于荧光抗体染色技术并借助流式细胞仪敏感的分辨力所建立的方法。该法主要用于细胞内细胞因子和细胞表面黏附分子的检测，通过特异性的荧光抗体染色，能简单、快速地进行单个细胞水平的细胞因子或黏附因子的检测，精确判断不同细胞亚群的细胞因子和膜分子的表达情况。...
