实验五黄瓜愈伤组织增殖和分化实验五黄瓜愈伤组织增殖和分化（一）实验目的（一）实验目的掌握黄瓜愈伤组织的增殖和分化技术，熟悉植物掌握黄瓜愈伤组织的增殖和分化技术，熟悉植物组织继代培养操作过程。组织继代培养操作过程。（二）实验原理（二）实验原理在不同的条件下（主要是植物生长调节剂在不同的条件下（主要是植物生长调节剂配比的不同），愈伤组织可以分化成芽、配比的不同），愈伤组织可以分化成芽、根等不同器官，也可以继续形成更多的愈根等不同器官，也可以继续形成更多的愈伤组织。伤组织。（三）实验材料和用具（三）实验材料和用具实验材料：实验材料：黄瓜愈伤组织黄瓜愈伤组织实验药品实验药品：：MSMS、、1mg/mlNAA1mg/mlNAA、、1mg/ml6-BA1mg/ml6-BA、、1mol/LHCl1mol/LHCl、、1mol/LNaOH1mol/LNaOH、蒸馏水、、蒸馏水、灯用酒精、灯用酒精、7070％酒精。％酒精。灭菌培养基：灭菌培养基：MS1MS1、、MS2MS2和和MS7MS7实验用具：实验用具：天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三角瓶、角瓶、pHpH试纸、电炉、高压灭菌锅。试纸、电炉、高压灭菌锅。无菌室、勺子、酒精灯、酒精棉花、滴管、无菌室、勺子、酒精灯、酒精棉花、滴管、记号笔、废液罐、火柴、光照培养箱。记号笔、废液罐、火柴、光照培养箱。（四）实验步骤（四）实验步骤1.1.配制以下培养基各配制以下培养基各100ml100ml：：MS4MS4：：MS+2.0mg/LBA+2.0mg/LNAAMS+2.0mg/LBA+2.0mg/LNAAMS7MS7：：MS+0.1mg/LBA+2.0mg/LNAAMS+0.1mg/LBA+2.0mg/LNAAMS8MS8：：MS+2.0mg/LNAAMS+2.0mg/LNAA①①取取200ml200ml烧杯烧杯33只，标记，各加入只，标记，各加入4gMS4gMS培养基和培养基和1100ml00ml蒸馏水，加热直至完全溶解。蒸馏水，加热直至完全溶解。②②各加入各加入1mg/mlNAA200µl1mg/mlNAA200µl，并不断搅拌。，并不断搅拌。③③分别加入分别加入1mg/ml6-BA200µl1mg/ml6-BA200µl、、10µl10µl和和0µl0µl，并不，并不断搅拌。断搅拌。④④用用1mol/LHCl1mol/LHCl或或NaOHNaOH调节调节pHpH至至5.85.8～～6.06.0。。2.2.分装。将分装。将33种培养基分别分装到种培养基分别分装到44个三角瓶中，个三角瓶中，做好标记。做好标记。3.3.灭菌。用高压蒸汽灭菌锅在灭菌。用高压蒸汽灭菌锅在121℃121℃、、0.1MPa0.1MPa条条件下灭菌件下灭菌1515～～20min20min。操作按仪器操作步骤进。操作按仪器操作步骤进行。灭...
