实验实验三三&&四四细胞的原代和传代培养细胞的原代和传代培养•实验目实验目的的•初步掌握哺乳动物细胞的原代培养与传代培初步掌握哺乳动物细胞的原代培养与传代培养的基本原理和操作过程，为生物工程在医养的基本原理和操作过程，为生物工程在医学上的应用打下基础。学上的应用打下基础。实验用品实验用品一、材料和标本乳鼠、一、材料和标本乳鼠、HeLaHeLa细胞（人宫颈癌细细胞（人宫颈癌细胞）胞）二、器材和仪器手术器械、平皿、培养瓶、吸管、二、器材和仪器手术器械、平皿、培养瓶、吸管、离心管（灭菌后备用）、酒精灯、烧坏、超净工离心管（灭菌后备用）、酒精灯、烧坏、超净工作台、二氧化碳培养箱、倒置显微镜。作台、二氧化碳培养箱、倒置显微镜。三、试剂含有三、试剂含有5%5%小牛血清的小牛血清的MEMMEM培养液、培养液、0.0.01mo101mo1／／LPBSLPBS，，0.25%0.25%胰蛋白酶／胰蛋白酶／0.02%EDT0.02%EDTAA混合消化液、混合消化液、75%75%乙醇。乙醇。实验内容实验内容•一、一、原代细胞培养原代细胞培养•((一一))原理原理•细胞培养（细胞培养（CellcultureCellculture）是模拟机体内生理条件，）是模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。细胞工程等问题的研究。•由体内直接取出组织或细胞进行培养叫由体内直接取出组织或细胞进行培养叫原代培养原代培养。。•原代培养细胞离体时间短，性状与体内相似，适用原代培养细胞离体时间短，性状与体内相似，适用于研究。于研究。•一般说来，幼稚状态的组织和细胞，如：动物的胚一般说来，幼稚状态的组织和细胞，如：动物的胚胎、幼仔的脏器等更容易进行原代培养。胎、幼仔的脏器等更容易进行原代培养。实验方法实验方法•单层细胞培养法单层细胞培养法酶消化组织使其分离成单酶消化组织使其分离成单个细胞或较小细胞团，接种培养。个细胞或较小细胞团，接种培养。•组织块培养法组织块培养法把组织小块（把组织小块（0.50.5－－1mm1mm33）直接贴附培养瓶壁，细胞自组织块边缘向）直接贴附培养瓶壁，细胞自组织块边缘向外长出生长晕，最后连接成片形成单层细胞。外长出生长晕，最后连接成片形成单层细胞。•本次实验采用本次实验采用组织块培养法。组织块培养法。操作操作步骤步骤•11．取材...
