实验二植物组织培养——愈伤组织的诱导实验目的学习诱导植物器官外植体形成愈伤组织的方法。实验原理来自于植物各种器官的外植体在离体培养条件下，给予合适的营养条件和激素水平，细胞经脱分化等一系列过程，改变了它们原有的特性而转变形成一种能迅速增殖的无特定结构和功能的细胞团，即愈伤组织。植物生长调节剂是诱导愈伤组织形成的极为重要的因素。利用愈伤组织可以进行一些生物化学、发育学、遗传学等方面的研究工作。实验用品1.培养基：诱导胡萝卜块根愈伤组织培养基为：MS＋2，4-D1mg／L十蔗糖3g／L十琼脂0.8g/L，pH5.8。2.试剂：2％次氯酸钠，70％乙醇，无菌水。3.器具：培养皿，烧坏，镊子，剪刀，小三角烧瓶，大三角烧瓶，酒精灯，酒精棉花，滴管，试剂瓶，滤纸，锡箔纸，超净工作台，植物细胞培养室。实验步骤1.肥皂水洗手并冲净，将事先用自来水洗净的胡萝卜根切成1×1×4cm的长段（多带含形成层的韧皮部），投入70％乙醇中浸泡30s，再转入小烧杯内的2％次氯酸钠液中，消毒10min。2.移入超净台内，按无菌操作要求将根块取出置于无菌培养皿内，用滴管吸取无菌水反复冲洗，再用无菌镊子移入另一无菌培养皿内，再用无菌水冲洗。3.将根块用消毒滤纸吸干，移入一无菌培养皿盖内，切成3×3×1.5mm3大小。4．消毒镊子夹取组织小块放入有MS固体培养基的小三角烧瓶内，种植在培养基表面，每瓶放5一6块，盖上牛皮纸。注明标记。每人接种一瓶。5.培养室内27℃弱光条件下培养10天左右。实验结果作业1.观察接种的外植体在接种1周后产生愈伤组织的质地和颜色，计算愈伤组织诱导率：诱导率（%）=(形成愈伤组织的材料数/总接种材料数)×100％2.观察组织细胞有无污染，分析原因。
