邻二氮菲分光光度法测定铁含量1.通过本实验了解分光光度法的基本原理和基本方法。2.掌握邻二氮菲吸光光度法测定铁的方法。3.学习吸光光度法测定铁吸收曲线和标准曲线的绘制方法。4.了解分光光度计的构造、性能及使用方法。实验目的分光光度法(spectrophotometry):根据物质的分子对光的选择性吸收而建立起来的分析方法，是应用分光光度计测量溶液在某一波长下的吸光度以确定溶液中被测物质含量的分析方法。一、分光光度法根据所用光源波长的不同，分光光度法可分为：可见分光光度法（380-760nm）、紫外分光光度法（200-380nm）和红外分光光度法（780-300000nm）。一、分光光度法当光照射到某物质或某溶液时，组成物质的分子、原子或离子与光子发生“碰撞”，由于分子、原子或离子的能级是量子化的，不连续的，只有光子的能量(hν)与被照射物质粒子的基态和激发态能量之差(ΔE)相等时，才能被吸收。——物质对光的吸收。物质对光选择性吸收M(基态)+hν→M*(激发态)不同物质的基态和激发态的能量差不同，选择吸收光子的能量也不同，及吸收的波长就不同。S0E0S1E1S2E2hν=E2-E0一、分光光度法透光率（Transmittance）I0ItIaI0=Ia+It透光率t0ITI入射光透射光T的取值范围：0.0%~100.0%全部吸收：0.0%全部透射：100%结论：溶液的透光率越大，表示它对光的吸收越小；反之，透光度越小，对光吸收越大。一、分光光度法吸光度0tlglgIATI吸光度（Absorbance）实验证明：溶液吸光度，与溶液浓度、液层厚度和入射光波长等因素有关。I0ItIa入射光透射光一、分光光度法物质的吸收光谱同一种物质对不同波长的光的吸收程度不同，吸光度最大的处对应的波长为最大吸收波长λmax。不同浓度的同一物质，其吸收曲线性质相似λmax不变。而对于不同物质它们的吸收曲线形状和λmax不同。吸收曲线可以提供物质结构信息，作为物质定性分析的依据。以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标作图，可得吸收光谱(吸收曲线)一、分光光度法不同浓度的同一物质，在某一波长下吸光度A有差异，在λmax处吸光度A差异最大。浓度越大，吸光度越大，此特性可以作为物质的定量分析的依据。在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。一、分光光度法二、Lambert-Beer定律根据Lambert-Beer定律数学表达式：A=εbcb—液层厚度（光程长度，cm）c—是溶液的物质的量浓度ε—是摩尔吸光系数（单位为L·mol-1·cm-1），与...
