第16章植物原生质体融合技术提要植物原生质体的制备与融合植物原生质体的分离植物原生质体融合筛选植物原生质体融合的意义植物原生质体的分离机械分离法细胞在高渗糖溶液中发生轻微质壁分离,原生质收缩酶解分离法常用的细胞壁降解酶:纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶等影响原生质体数量和活力的因素细胞壁降解酶的种类和组合渗透压稳定剂多用甘露醇质膜稳定剂Ph的影响温度影响植物材料的生理状态植物原生质体的纯化过滤法离心法飘浮法植物原生质体的融合植物原生质体的融合(体细胞杂交):是指将不同来源的植物原生质体相融合并使之分化再生、形成新物种或新品种的技术融合技术盐类融合法高Ca2+、高pH融合法聚乙二醇融合法(PEG)PEG、高Ca2+、高pH相结合的融合法电融合法融合体自体融合异体融合协和的细胞杂种部分和谐的细胞杂种异胞质体细胞杂种嵌合细胞杂种培养方法固体培养法浅层液体培养法双层培养法杂种细胞的筛选遗传互补选择法营养缺陷型互补、抗性互补选择法可见标记法凹穴皿分离法、微吸管分离法体细胞杂种的鉴定杂种植物的形态学鉴定杂种植物的细胞学鉴定杂种植物的生化分析鉴定体细胞融合的意义克服种、属以上植物有性杂交不亲合性障碍,为广泛重组遗传物质开辟了新途径创造细胞质杂种