第5章 单克隆抗体(改).pptVIP免费

5.2人源性单克隆抗体的制备多克隆抗体鼠源单克隆抗体人-鼠嵌合抗体人源化抗体全人源抗体鼠源单抗临床应用的障碍血清半衰期短，20h抗原抗体结合力、亲和力不够募集效应细胞产生副作用HAMA反应：8－10天出现，20－30天高峰,加速单抗清除。过敏休克HAMA反应HumanAnti-MouseAntibodies鼠来源的单抗在人体内是外源物质，很可能会产生人体免疫系统对它的排斥反应：产生抗鼠的抗体，叫做人抗鼠抗体（HAMA）反应。HAMA反应对鼠源的单抗分子有着较强的破坏作用，严重影响了鼠源单抗在人体内的功效，所以非常有必要改进鼠源单抗。抗体研究的世代第一代多克隆抗体第二代单克隆抗体第三代基因工程抗体抗体的结构及其多样性抗体的结构及其多样性轻链重链免疫球蛋白的基本结构四条链对称结构四条链对称结构互补决定区互补决定区complementaricomplementarittydeterydeterminingregions(CDRminingregions(CDR))小鼠抗体嵌合抗体重构抗体人源抗体5.2人源性单克隆抗体的制备5.2.1EB病毒转化技术5.2.2细胞工程单克隆抗体技术1人-鼠杂交瘤单克隆抗体2人-人杂交瘤单克隆抗体3EB病毒转化-融合技术4转基因动物制备单克隆抗体5重症联合免疫缺陷小鼠制备单克隆抗体5.2.3人单抗制备技术的发展（新基因工程技术）5.2.1EB病毒转化技术EB病毒（epstein-barrvirus,EBv）是epstein和barr于1964年首次成功地将burkitt非洲儿童淋巴瘤细胞通过体外悬浮培养而建株，并在建株细胞涂片中用电镜观察到疱疹病毒颗粒，故名。EB病毒的形态与其他疱疹病毒相似。EB病毒仅能在B淋巴细胞中增殖，可使其转化，能长期传代。EBEB病毒转化淋巴细胞病毒转化淋巴细胞5.2.2细胞工程单克隆抗体技术1人-鼠杂交瘤单克隆抗体人脾细胞＋鼠骨髓瘤细胞5.2.25.2.2细胞工程单克隆抗体技术细胞工程单克隆抗体技术2人-人杂交瘤单克隆抗体人脾细胞＋人骨髓瘤细胞细胞种类少5.2.25.2.2细胞工程单克隆抗体技术细胞工程单克隆抗体技术3EB3EB病毒转化病毒转化--融合技术融合技术利用EB病毒转化B淋巴细胞为永生细胞与鼠骨髓瘤细胞融合5.2.25.2.2细胞工程单克隆抗体技术细胞工程单克隆抗体技术44转基因动物制备单克隆抗体转基因动物制备单克隆抗体人抗体基因(除CDR)导入小鼠胚胎转基因小鼠抗原免疫转入人的Ig基因组免疫动物人抗体基因敲除小鼠将小鼠Ig基因敲除，转染人Ig基因，在小鼠体内产生人Ab，再经杂交瘤技术，产生大量完全人源化抗体5.2.25.2.2...