按学号入座讲台医学免疫学实验课免疫学教研室崔畅婉实验课占总成绩30%,其中实验设计20%,课堂表现10%准时,注意课堂纪律穿白大衣贵重物品随身携带爱惜实验室设备和器材注意水、电、煤气认真做实验记录课后恢复实验台初始状态分组值日要求选择适当量程的加样器P20:0.5~20.0µlP200:20~200µlP1000:200~1000µl转动旋钮,调整量取体积顺时针旋转增加体积逆时针减少体积禁止超出量程范围,否则会损坏加样器拇指操作加样器芯,其它四指弯曲握住加样器加样枪使用方法及注意事项安装相应的枪头白色P20黄色P200蓝色P1000注意无菌操作按加样器芯时会遇到两个阻力点到达第一个阻力点时为量取液体的体积只在完全排出液体时才使用第二个阻力点吸取液体时只需按到第一个阻力点实验完成之后,将加样器调至最大量程加样器使用方法及注意事项操作步骤加包被液(SRBC)每孔100μl,37℃40min洗板2次,弃上清,加封闭液,每孔200μl37℃,1小时弃去孔中液体,洗板1次每2名同学1条反应板,在板子侧面标学号拍干板条,4℃保存备用实验内容试剂与材料绵羊红细胞(SRBC)裂解液封闭液(5%BSA/PBS溶液)洗涤液(PBS+Tween,pH7.4)一、ELISA实验准备(包被、封闭)YYYYYYYYYYYYYYSRBC碎片—AgYY待测血清-Ab酶标二抗底物产物用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部,放在铁笼上,小鼠自然向前挣扎用左手食指和拇指捏住小鼠头部两边疏松的皮肤提起小鼠用左手小指和无名指压住小鼠尾部,固定小鼠注意:小鼠尾巴的尾端容易断裂,抓小鼠应抓尾巴中部或根部小鼠抓取方法小鼠的抓取及固定(1)(2)(3)左手提起并固定小鼠,使鼠腹部朝上右手持注射器将针头在下腹部靠近腹白线的两侧进行穿刺,针头刺入皮肤后进针3mm左右使注射针头与皮肤呈45°角刺入腹肌,穿过腹肌进入腹膜腔,当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后阻力消失,有落空感固定针头,保持针尖不动,回抽针栓,如无回血、肠液或尿液后即可注射腹腔注射(看录像)小鼠标记(苦味酸)4人一组(先发PBS对照,同时1ml绵羊血,离心2000rpm,6min做完后发SRBC)2人一只小鼠实验组:腹腔注射2%的SRBC1ml对照组:腹腔注射PBS1ml二、小鼠腹腔免疫小心吸弃上清,留红细胞沉淀加入1mlPBS混匀即为2%绵羊红细胞悬液绵羊红细胞(SRBC)的制备注射之前排空注射器中的空气SRBC使用之前要混匀小鼠会咬人,一定固定好头部最好一次成功...