生物信息与数据处理生物信息与数据处理第三节基因组分析策略和技术第三节基因组分析策略和技术11克隆克隆克隆(克隆(cloningcloning):涉及将特定):涉及将特定DNADNA片段插入片段插入类似于染色体的载体(类似于染色体的载体(vectorvector)中,载体使它们)中,载体使它们能在活细胞内进行复制。能在活细胞内进行复制。由于所有片段的拷贝都是相同的,所由于所有片段的拷贝都是相同的,所以叫分子克隆(以叫分子克隆(molecularclonemolecularclone),这些片段),这些片段可纯化并可直接用于研究或储存在文库中以便进可纯化并可直接用于研究或储存在文库中以便进一步分析。一步分析。一分子生物学工具一分子生物学工具基因文库(基因文库(geneticlibrarygeneticlibrary):所有克隆到载):所有克隆到载体上的基因的集合形成基因文库(体上的基因的集合形成基因文库(geneticgeneticlibrarylibrary)。一个理想的基因文库应包括一个生物)。一个理想的基因文库应包括一个生物体体DNADNA中每个片段的拷贝。中每个片段的拷贝。基因组等价物(基因组等价物(geneticequivalentgeneticequivalent)在这样)在这样一个完整的基因组文库中克隆的数目(用基因组一个完整的基因组文库中克隆的数目(用基因组的大小除以平均片段长度)称为基因组等价物的大小除以平均片段长度)称为基因组等价物((geneticequivalentgeneticequivalent)。)。克隆过程的随机性使某些片段将被克隆多次而另克隆过程的随机性使某些片段将被克隆多次而另一些可能在基因组等价物中并不出现。增加基因一些可能在基因组等价物中并不出现。增加基因组文库中克隆的数量将增加任一给定组文库中克隆的数量将增加任一给定DNADNA片段片段都至少含有其一个拷贝的可能性。具有都至少含有其一个拷贝的可能性。具有44个或个或55个基因组等价物的文库平均每个个基因组等价物的文库平均每个DNADNA片段有片段有44或或55个拷贝,基因组任一特定部分有至少一个拷个拷贝,基因组任一特定部分有至少一个拷贝的可能性为贝的可能性为95%95%。。分子克隆技术流程分子克隆技术流程2基因组文库chromosomesonificationcloningGenomicDNAlibraryVector3cDNA3cDNA文库(文库(cDNAlibrarycDNAlibrary))所有蛋白编码区域共有的特征是它们被核糖体翻译所有蛋白编码区域共有的特征是它们被核糖体翻译之前全转化成之前全转化成mRNAmRNA。。逆转录酶(逆转录酶(reversetranscriptasereve...