酶分子侧链基团的化学修饰•一．特定氨基酸残基侧链基团的化学修饰•二．几种重要的修饰反应•酶分子中经常被修饰的氨基酸残基侧链基团有：巯基，氨基，羧基，咪唑基，酚基，胍基，吲哚基，硫醚基及二硫键等。一．特定氨基酸残基侧链基团的化学修饰1．巯基的化学修饰•巯基具有很强的亲核性，采用巯基化学修饰剂与酶蛋白侧链上的巯基结合，使巯基发生改变，从而改变酶的空间构象、特性和功能。•①烷基化试剂烷基试剂中用得最多的是碘乙酸，碘乙酰胺,巯基乙醇，谷胱甘肽(GSH)。E—SH+ICH2COOH(或ICH2CONH2)→E—S—CH2COOH(或E—S—CH2CONH2)+HI②汞试剂这类试剂如HgCl2，对氯汞苯甲酸(pCMB)和2—氯汞硝基苯酚等。2．氨基的化学修饰①乙酸酐修饰②2,4,6—三硝基苯磺酸修饰.③2,4—二硝基氟苯修饰(Sanger反应)④氨基的烷基化.这类试剂包括卤代乙酸,芳香卤和芳香磺酸等.⑤丹磺酰氯(DNS)修饰.⑥苯异硫氰酸酯(PITC)修饰(即Edman反应)3．羧基的化学修饰修饰羧基的反应专一性较差。常用水溶性碳化二亚胺修饰天冬氨酸和谷氨酸。可定量测定酶分子中羧基的数目。4．咪唑基的化学修饰常用修饰剂：碘乙酸、焦碳酸二乙酯等；其中焦碳酸二乙酯在近中性的条件下对组氨酸残基上的咪唑基具有较好的特异修饰能力，而且产物在240nm波长处有最大吸收峰，可以通过修饰得知分子中咪唑基的数量。5.胍基的化学修饰来源：Arg修饰反应：本质上是羰基对氨基酰基化。修饰剂：丁二酮二羰基化合物1，2－环己二酮苯乙二醛1．烷基化反应几种重要的修饰反应2．酰化及其相关反应3．氧化和还原反应4．芳香环取代反应•重要的修饰反应*•特定氨基酸残基侧链基团的化学修饰*酰化及其相关反应烷基化反应氧化和还原反应芳香环取代反应巯基的化学修饰氨基的化学修饰羧基的化学修饰咪唑基的化学修饰胍基的化学修饰二硫基的化学修饰
