（一）培养基的制备与灭菌实验五、土壤中微生物的分离纯化与活菌计数一、培养基的制备目的要求明确培养基的配制原理通过对基础培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤按培养基的用途分基础培养基鉴别培养基选择培养基按培养基的物理状态分固体培养基半固体培养基液体培养基基本原理按成分不同分天然培养基合成培养基半合成培养基培养基的配方牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（一种天然培养基，用于分离和培养细菌）配方：牛肉膏3g蛋白胨10g氯化钠5g琼脂20g水1000mlpH7-7.2灭菌121℃20min高氏Ⅰ号培养基（一种合成培养基，可用于培养放线菌）配方：可溶性淀粉20gKNO31gNaCl0.5gK2HPO40.5gMgSO40.5gFeSO40.01g琼脂20g水1000mlpH7.2～7.4灭菌121℃20min马丁氏培养基（一种合成培养基，可用于分离培养真菌）配方：蛋白胨５g葡萄糖10gK2HPO4１gMgSO4·7H2O0.5g琼脂20g１%孟加拉红水溶液3.3ml水1000mlpH自然灭菌121℃30min使用前，添加链霉素固体淀粉培养基（一种鉴别培养基，用于大分子物质水解的生理生化鉴定）配方：蛋白胨10gNaCl5g牛肉膏5g可溶性淀粉2g蒸馏水1000ml琼脂20g灭菌12120min℃葡萄糖蛋白胨水培养基（一种鉴别培养基，用于肠道菌的生理生化鉴定）配方：蛋白胨5g葡萄糖5gK2HPO42g蒸馏水1000mlpH7.0～7.2灭菌11230min℃器材溶液或试剂4mol/LNaOH，1mol/LHCl，各类培养基的配方药品。仪器或其他用具试管，三角瓶，搪瓷杯，量筒，天平，药匙，电磁炉，高压蒸气灭菌锅，pH试纸(pH5.5～9.0)，硅胶塞，棉花，报纸，记号笔等。操作步骤（一）1．计算：根据配方按照用量计算。2.称量：3．溶解：如有琼脂，要不断搅拌避免糊底。4、调节pH：用1mol/LNaOH或1mol/LHCl调节，以pH试纸或pH计测定。5．过滤：趁热用四层纱布过滤。（本次实验省略）操作步骤（二）6.分装试管：固体不超过试管高度的1/5；液体、半固体不超过试管高度的1/4或1/3。三角烧瓶：总体积的一半为限。管口或瓶口不得沾有培养基操作步骤（三）7.加塞1.正确；2.管内部分太短，外部太松；3.外部过小操作步骤（三）8.包扎：注明培养基的名称。9.灭菌：按不同培养基所需的温度、时间灭菌。10.搁置斜面(1/3～l/2，不能超过1/2)。11.无菌检查实验无菌器皿的准备无菌水：在试管或三角瓶内量取实验所需的自来水，经121℃20min灭菌。无菌移液吸管、培养皿：报纸包扎后，经121℃20min灭菌了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。目的要求二、消毒与灭...
