专题八现代生物科技专题第一讲基因工程和细胞工程高频考点整合考点一基因工程的操作步骤和应用1．基因工程的操作步骤(1)目的基因的获取①目的基因：编码蛋白质的结构基因。②目的基因的获取途径a．从自然界中已有的物种中分离出来，如可从基因组文库或cDNA文库中获取。b．人工合成目的基因：根据已知的核苷酸序列，利用原料以化学方法合成。常用的方法有反转录法和化学合成法。c．利用PCR技术扩增目的基因通过PCR技术可对已获取的目的基因进行扩增，以获取大量的目的基因。(2)基因表达载体的构建(基因工程的核心)①目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可遗传给下一代，并能够表达和发挥作用。目的基因启动子：为RNA聚合酶识别和结合部位，驱动转录mRNA终止子：使转录终止的特殊结构的DNA片段标记基因：可鉴别受体细胞是否含有目的基因基因表达载体组成②③过程(3)将目的基因导入受体细胞①导入原理：借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。②导入过程生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法(主要)、基因枪法和花粉管通道法显微注射技术Ca2＋处理法受体细胞体细胞受精卵原核细胞转化过程将目的基因插入Ti质粒的T－DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA→表达将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子(4)目的基因的检测与鉴定①导入检测：DNA分子杂交技术(即使用放射性同位素或荧光分子标记的DNA作探针进行检测)。DNA和DNA之间，看是否出现杂交带。③个体生物学水平鉴定。例如：抗虫或抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性程度；对基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较，以确定功能是否相同。转录检测：分子杂交技术，DNA和mRNA之间，看是否出现杂交带翻译检测：抗原—抗体杂交，看是否出现杂交带②表达检测2．基因工程的应用(1)植物基因工程抗虫转基因植物——减轻农药对环境的污染抗病转基因植物抗逆转基因植物改良植物品质(2)动物基因工程提高动物生长速度改善畜产品的品质用转基因动物生产药物用转基因动物作器官移植的供体基因工程药品的生产(3)基因治疗把正常基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用方法体外基因治疗体内基因治疗训练1(2010·福建卷，32)红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成...
