山东医药2023年第63卷第23期抑制LncRNAPANDA表达对人心脏瓣膜间质细胞钙化的改善作用及其机制凌秋洋1,赵苗茁1,王广涛1,杨志宏2,刘叶红3,叶挺3,宗刚军31中国人民解放军海军青岛特勤疗养中心老年病康复科,山东青岛266000;2中国人民解放军海军第九七一医院心内科;3中国人民解放军联勤保障部队第九〇四医院心内科摘要:目的观察抑制长链非编码RNAPANDA(LncRNAPANDA)表达对人心脏瓣膜间质细胞(hVICs)钙化的影响,并探讨其机制是否与核酸转录因子YA(NF-YA)、凋亡相关蛋白Bax、锚定蛋白2(Notch2)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)有关。方法将体外培养的hVICs分为三组,正常对照组加入间质细胞培养基+10%胎牛血清,培养7d;钙化组加入钙化诱导液,培养7d。PANDA-siRNA组加入钙化诱导液培养3d后,采用Lipofectamine™3000转染试剂盒转染PANDA-siRNA,再培养4d。取各组分组培养7d的细胞,采用实时荧光定量PCR法检测LncRNAPANDA相对表达量,光学显微镜观察细胞形态,Westernblotting法检测NF-YA、Bax、Notch2、BMP-2蛋白相对表达量,ELISA法检测细胞上清液BMP-2水平。结果PANDA-siRNA组、正常对照组、钙化组细胞LncRNAPANDA相对表达量及上清液BMP-2蛋白水平均依次升高,组间两两比较P均<0.05。PANDA-siRNA组细胞结构清晰,呈条索状生长,生长稍缓慢;钙化组细胞成骨样改变,细胞聚集,呈网状结构;正常对照组细胞贴壁生长,生长迅速。与正常对照组比较,钙化组细胞NF-YA、Bax、Notch2、BMP-2蛋白相对表达量均升高,PANDA-siRNA组均降低(P均<0.05)。结论诱导钙化后的hVICsLncRNAPANDA表达升高,抑制LncRNAPANDA表达可减轻其成骨样改变,其机制可能与降低NF-YA、Bax、Notch2、BMP-2表达有关。关键词:长链非编码RNAPANDA;核酸转录因子YA;凋亡相关蛋白;骨形态发生蛋白2;人心脏瓣膜间质细胞;瓣膜钙化;心脏瓣膜病doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2023.23.010中图分类号:R542.5文献标志码:A文章编号:1002-266X(2023)23-0043-04EffectofinhibitionofLncRNAPANDAexpressiononcalcificationofhumanheartvalvestromalcellsanditsmechanismLINGQiuyang1,ZHAOMiaozhuo,WANGGuangtao,YANGZhihong,LIUYehong,YETing,ZONGGangjun1DepartmentofGeriatricRehabilitation,QingdaoSpecialServicemenRecuperationCenterofPLANavy,Qingdao266000,ChinaAbstract:ObjectiveToobservetheeffectofinhibitionoflongnon-codingRNAPANDA(LncRNAPANDA)e...