专题二十七基因工程和生物技术的安全性与伦理问题专题检测题组A组1.图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作。若限制酶EcoRⅠ识别G↓AATTC,BamHⅠ识别G↓CATCC。下列选项正确的是()A.利用PCR技术扩增基因时,反应缓冲溶液中要添加Ca2+来激活DNA聚合酶B.构建基因表达载体时可使用E.coliDNA连接酶将DNA片段连接起来C.农杆菌侵染人参细胞后Ti质粒整合到受体细胞的染色体DNA上D.检测干扰素基因是否导入人参愈伤组织细胞需要利用抗原—抗体杂交答案B利用PCR技术扩增基因时,反应体系中一般要添加Mg2+来激活耐高温的DNA聚合酶,A错误;由于EcoRⅠ和BamHⅠ对目的基因和Ti质粒进行切割产生的是黏性末端,黏性末端可以用E.coliDNA连接酶进行连接,B正确;农杆菌侵染人参细胞后,整合到宿主细胞染色体DNA上的是Ti质粒上的T-DNA片段,而不是整个Ti质粒,C错误;检测目的基因是否导入受体细胞常用分子杂交技术,D错误。2.荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量,其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针,当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处时,会水解探针,使荧光监测系统接收到荧光信号,即每扩增一次,就有一个荧光分子生成,过程如图所示。下列相关叙述错误的是()A.引物与探针均具特异性,与模板结合时遵循碱基互补配对原则B.反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关C.若用cDNA作模板,上述技术也可检测某基因的转录水平D.耐高温的DNA聚合酶催化DNA的合成总是从子链的3'端向5'端延伸的答案DPCR中,引物是利用目的基因的一部分已知序列设计出来的,探针也是通过待测序列的一部分设计出来的,均具有特异性,且二者都是通过碱基互补配对原则与模板结合的,A正确;由题可知,荧光的产生是荧光探针被水解所致,因此起始时的模板DNA含量越高,与其结合的荧光探针就越多,扩增时水解的探针越多,荧光就越强,B正确;若用cDNA作模板进行转录,水解特异性荧光探针时会发出荧光,根据荧光的强度可确定转录水平,C正确;耐高温的DNA聚合酶催化DNA的合成,总是从子链的5'端向3'端延伸的,D错误。3.基因编辑CRISPR/Cas9系统由Cas9蛋白和人工设计的gRNA构成。在gRNA引导下,Cas9与靶序列结合并将DNA双链切断。通过在Cas9基因中引入突变,获得了只有切割一条链活性的nCas9,可以实现C→T(G→A)或A→G(T→C)的碱基替换。下列相关说法不正确的是()A.gRNA与靶序列特异性结合遵循碱基互补配对原则B.利用CRISPR/Cas9系统可以使...
