DOI:10.16605/j.cnki.1007-7847.2022.09.0202几丁质降解菌Acinetobactersp.WML1的生物安全性和发酵优化唐白露1,刘木兰1,旷琦颖1,何雪婷1,刘佳1,唐映红1,何海伦2*(1.湖南文理学院生命与环境科学学院常德市农业生物大分子研究中心环洞庭湖水产健康养殖及加工湖南省重点实验室,中国湖南常德415000;2.中南大学生命科学学院,中国湖南长沙410013)摘要:Acinetobactersp.WML1分离自淡水湖渔场沉积物,能降解几丁质,具有一定的应用价值。为了评价菌株WML1的生物安全性,为菌株的安全使用提供参考和保障,采用常规纸片扩散法检测耐药性,用血琼脂平板划线法检测溶血性,用溴甲酚紫显色法检测氨基酸脱羧酶活性,用试剂盒测定硝酸还原酶活性。在菌株生物安全性分析的基础上,通过单因素试验法和正交试验法进行菌株WML1产几丁质酶发酵条件的优化。结果表明,菌株WML1对多种抗生素敏感,无溶血性,无硝酸还原酶活性,有精氨酸脱羧酶活性及微弱的赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶活性;其最优产酶条件为0.4%黄豆粉、0.20%半乳糖、0.03%KH2PO4、0.07%K2HPO4、0.002%FeSO4、0.05%MgSO4·7H2O、0.001%ZnSO4、0.60%胶体几丁质、pH9.5、5.0%的接种量、25mL的装液量(对应250mL容量瓶)、37℃的培养温度,优化后的几丁质酶活为(2.72依0.09)U/mL。综上所述,不动杆菌WML1在使用安全性上危害较小,可防可控,经发酵条件优化后其所产几丁质酶的活性提高了约4.61倍,为产几丁质酶菌株的工业化应用提供了理论基础。关键词:几丁质降解菌;几丁质酶;不动杆菌WML1;生物安全性;发酵优化中图分类号:Q939.9文献标志码:A文章编号:1007-7847(2023)04-0361-10BiosafetyandFermentationOptimizationofAcinetobactersp.WML1forChitinaseProductionTANGBailu1,LIUMulan1,KUANGQiying1,HEXueting1,LIUJia1,TANGYinghong1,HEHailun2*(1.HunanProvincialKeyLaboratoryforHealthAquacultureandProductProcessinginDongtingLakeArea,ChangdeResearchCenterforAgriculturalBiomacromolecule,CollegeofLifeandEnvironmentalSciences,HunanUniversityofArtsandScience,Changde415000,Hunan,China;2.SchoolofLifeSciences,CentralSouthUniversity,Changsha410013,Hunan,China)Abstract:Acinetobactersp.WML1wasisolatedfromthefisherysedimentsoffreshwaterlakesandprovedtohaveapplicationvalueduetoitsabilitytodegradechitin.Herein,thebiosafetyofthechitinase-producingstrainWML1wasfirstevaluatedforapplication.Thedrugresi...
