NSFC案例精讲班(八)解螺旋课堂2017酸菜解螺旋课堂0课程内容文献案例分析科学假设模式132标书写作讲解解螺旋课堂1文献案例分析解螺旋课堂1文献案例分析A.5株膀胱癌细胞评价多药耐药的实验策略(5637,T24,EJ,H-bc,Biu87)B.测试4种化疗药物的IC50(Pi,Pa,Ad,EH)C.耐药数据归一化解螺旋课堂1文献案例分析A.miRNA组学筛选和验证策略B.差异变化最为显著的miRNA热图C.qRT-PCR验证结果D.归一化数据表E.miR-193a-3p启动子区CpG岛甲基化F.甲基化测序结果G.CpG岛甲基化比例H.CpG岛甲基化数据柱形图解螺旋课堂1文献案例分析A.miR-193a-3p靶基因验证实验策略B.测序结果中SRSF2,HIC2andPLAU的表达C.qRT-PCR检测SRSF2,HIC2andPLAU表达D.SRSF2,HIC2andPLAU表达Western结果E.miR-193a-3p过表达和沉默,靶蛋白表达F.miR-193a-3p过表达,靶基因mRNA表达G.荧光素酶报告载体构建策略H.PLAU基因荧光素酶报告系统验证结果I.HIC2基因荧光素酶报告系统验证结果解螺旋课堂1文献案例分析A.实验策略图B.化疗药物处理后细胞IC50(3pvs.5p)C.miR-193a-3pvs.5p靶基因蛋白表达D.miR-193a-3pvs.5p抑制剂处理IC50E.抑制剂处理3pvs.5p靶基因蛋白表达F.G图的数据做柱形图分析G.siRNA抑制下游靶基因表达Western结果H.siRNA抑制下游靶基因实验IC50结果I.siRNA抑制下游靶基因实验蛋白WesternJ.变化趋势总结K.下游靶基因过表达耐药表型验证解螺旋课堂1文献案例分析A.实验策略图B.PathwayArray分析7条通路受调控C.7条通路数据归一化D.通路中靶基因表达数据E.STRING调控网络图解螺旋课堂1文献案例分析A.实验策略图B.裸鼠成瘤典型图片C.瘤重数据图D.瘤重数据表E.靶基因免疫组化染色结果解螺旋课堂1文献案例分析逻辑思路:A膀胱癌细胞耐药Fig.1CFig.3miR-193a-3pSRSF2,PLAUandHIC2DmiR-193a-3pvs.5pFig.4膀胱癌细胞耐药EmiR-193a-3pSRSF2,PLAUandHIC2Fig.5下游分子调控网络BFig.2耐药细胞miROmics甲基化miR-193a-3pFFig.6动物实验验证miR-193a-3pvs.5p解螺旋课堂1文献案例分析解螺旋课堂1文献案例分析图1.建立PRL-3稳转AML细胞株A.细胞荧光表达B.PRL-3mRNA和蛋白表达C.稳转株不依赖IL-3D.克隆形成能力E.裸鼠成瘤解螺旋课堂1文献案例分析图2.筛选和验证PRL-3过表达之后受到调控的蛋白A.典型蛋白Western结果B.用另外两株AML细胞株进行调控验证C.Leo1受到PRL-3剂量依赖的调控(过表达)D.Leo1受到PRL-3剂量依赖的调控(siRNA)解螺旋课堂1文献案例分析图3.在PRL-3稳转株中沉默Leo1表达的...