申请代码:B0608受理部门:收件日期:受理编号:国家自然科学基金申请书(2008版)资助类别:青年科学基金项目亚类说明:附注说明:项目名称:关于改善甘油脱水酶机理性失活的研究申请者:李爽电话:020-39380629依托单位:华南理工大学通讯地址:广州大学城华南理工大学B6邮政编码:510006单位电话:87110625电子邮件:shuangli@scut.edu.cn申报日期:2008年3月5日国家自然科学基金委员会20806259国家自然科学基金申请书2008版第2页版本1.008.144基本信息yoKWT/OQ姓名李爽性别女出生年月1978年9月民族汉族学位博士职称讲师主要研究领域酶工程电话020-39380629电子邮件shuangli@scut.edu.cn传真020-39380629个人网页工作单位华南理工大学/生物科学与工程学院申请者信息在研项目批准号30700021名称华南理工大学代码51064101联系人杨晓娟电子邮件yangxj@scut.edu.cn依托单位信息电话87110625网站地址www.scut.edu.cn单位名称代码合作单位信息项目名称关于改善甘油脱水酶机理性失活的研究资助类别青年科学基金项目亚类说明附注说明申请代码B0608:生物化工与食品化工B060804:生物催化过程基地类别预计研究年限2009年1月—2011年12月研究属性应用基础研究项目基本信息申请经费31.0000万元摘要(限400字):甘油脱水酶(GDH)催化过程中的底物失活问题,是其在生物法合成1,3-丙二醇应用中的瓶颈问题。本课题就该酶催化过程中的底物失活过程和解决手段进行深入研究和探讨。(1)将GDH与辅酶AdoCbl的成键位点进行分类组合,对组合位点进行饱和突变,考察Co-N键长对Co-C键发生均裂的影响。(2)采用易错PCR在GDH活性中心附近引入随机突变,改变甘油与辅酶的相对位置,尽可能降低反应过程中自由基中间体与[Co]·发生湮灭反应的可能,从而避免GDH的底物失活。研究中,以申请者前期工作构建成功并商业化的高通量筛选体系为基础,通过考察突变体以甘油为底物反应的酶失活时间,筛选优势突变体。该突变体的获得,将有助于进一步揭示GDH与辅酶的相互作用方式及其对催化过程的影响,提出从根本上避免GDH催化过程中机理性失活的方法;此外,该项研究成果对其它AdoCbl依赖型酶机理性失活问题的解决也将提供有意义的参考。关键词(用分号分开,最多5个)甘油脱水酶;机理性失活;饱和突变;易错PCR;高通量筛选;本页已使用福昕阅读器进行编辑。福昕软件(C)2005-2008,版权所有,仅供试用。国家自然科学基金申请书2008版第3页版本1.008.144项目组主要成员(注:项目组主要成员不...