医学分子生物学杂志,2023,20(5):390-396JMedMolBiol,2023,20(5):390-396DOI:10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.003资助项目:新疆维吾尔自治区自然科学基金(No.2019D01C167)通讯作者:阿布都克尤木·阿布都吉力力(电话:13899887733,E-mail:abdkym9@163.com)ThisworkwassupportedbyagrantfromtheNaturalScienceFoundationofXinjiangUyghurAutonomousRegion(No.2019D01C167)Correspondingauthor:AbudukryumuAbudujilili(Tel:86-13899887733,E-mail:abdkym9@163.com)HIF-1α促进恶性脑膜瘤血管发生的分子机制帕热哈提江·依孜木,麦伍兰江·阿卜杜热西提,阿布都克尤木·阿布都吉力力新疆维吾尔自治区人民医院神经外科乌鲁木齐市,830001【摘要】目的探讨HIF-1α在恶性脑膜瘤血管发生中的关键作用机制。方法qPCR法和免疫组织化学法测定正常胎盘组织和良性(WHOⅠ级)至复发性(WHOⅡ~Ⅲ级)脑膜瘤组织中HIF-1α和IGF1R的mRNA和蛋白质表达水平。双荧光素酶报告基因分析和ChIP实验证明HIF-1α与IGF1基因调控区的直接作用关系。采用shRNA敲低间变性脑膜瘤CRL-3370细胞中HIF-1α的表达。ELISA法测定敲低HIF-1α后CRL-3370细胞分泌IGF1和VEGF的水平变化。蛋白免疫印迹法测定细胞中p-IGF1Rβ、IGF1Rβ和VEGFR2的表达水平变化。建立CRL-3370细胞与HUVEC2的共培养体系,通过缺氧培养诱导CRL-3370细胞中HIF-1α表达并随后进行shRNA敲低。CCK-8法测定共培养体系中HUVEC2的细胞增殖能力;qPCR法测定其胞内VEGF、ANGP1和MMP2mRNA的表达水平;划痕实验和Transwell细胞侵袭实验测定细胞迁移和侵袭能力。结果随着脑膜瘤由良性(WHOⅠ级)至复发性(WHOⅡ~Ⅲ级)进展,脑膜瘤组织中HIF-1α和IGF1R的mRNA和蛋白质表达水平增强(P<0.01)。与对照组相比,IGF1组的荧光素酶活性明显上调;与IGF1组相比,删除位点4组的荧光素酶活性被明显抑制(P<0.05)。ChIP实验结果显示,HIF-1α组IGF1site-4的DNA含量明显高于其对应IgG组的DNA含量(P<0.05)。与shRNANT组相比,HIF-1αshR-NA组CRL-3370细胞分泌IGF1和VEGF的水平明显降低;胞内p-IGF1Rβ、IGF1Rβ和VEGFR2的表达水平明显降低。共培养体系中HUVEC2的增殖能力明显降低;其胞内VEGF、ANGP1、MMP2mRNA表达水平明显降低;细胞迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05)。结论复发性脑膜瘤上调HIF-1α直接作用并增强IGF1/IGF1R轴促进HUVEC2的血管发生和肿瘤恶性进展。【关键词】脑膜瘤;HIF-1α;IGF1/IGF1R轴;血管发生【中图分类号】R739.9MolecularMechanismsofHIF-1αo...
