基金项目:国家自然科学基金青年科学基金资助项目(81601365);国家自然科学基金资助项目(面上项目)(81971522)作者单位:210008南京大学医学院附属鼓楼医院风湿免疫科通信作者:丁从珠,电子信箱:dingcongzhu@126.comToll样受体激活对间充质干细胞免疫调节功能的影响孙玥耿林玉黄赛赛王红丁从珠摘要目的探讨Toll样受体(Toll-likereceptor,TLR)激活对骨髓和脐带两种不同来源间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)免疫调节功能的影响,同时比较骨髓MSC与脐带MSC中TLR的表达情况。方法从关节置换术患者废弃的关节中取得骨髓,分离培养骨髓MSC。从健康产妇废弃的脐带中分离培养脐带MSC。采用TLR4激动剂脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、TLR3激动剂聚肌胞苷酸[polyinosinic-polycytidylicacid,Poly(I:C)]分别预处理骨髓MSC或脐带MSC,然后与健康志愿者外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcells,PBMC)共培养,共培养结束后流式细胞术检测PBMC增殖情况。以实时荧光定量聚合酶链反应(real-timequantitativepolymerasechainreaction,RT-qPCR)检测骨髓MSC和脐带MSC中TLR4、TLR3的基因表达水平。流式细胞术检测骨髓MSC和脐带MSC中TLR4、TLR3的蛋白表达水平。结果骨髓MSC与PBMC共培养实验结果显示,LPS预处理可以明显降低骨髓MSC对PBMC增殖的抑制效应,Poly(I:C)预处理对骨髓MSC免疫调节功能无显著影响。脐带MSC与PBMC共培养实验结果显示,LPS或Poly(I:C)预处理对脐带MSC抑制PBMC增殖的影响均不显著。与骨髓MSC比较,脐带MSC中TLR4、TLR3的基因和蛋白表达水平均明显更低。结论TLR4激活可以干扰骨髓MSC的免疫调节功能,但是TLR4或TLR3激活对脐带MSC免疫调节功能的影响并不显著,可能与脐带MSC中TLR4、TLR3的基础表达量低有关。关键词脐带间充质干细胞骨髓间充质干细胞Toll样受体免疫调节中图分类号R593文献标识码ADOI10.11969/j.issn.1673-548X.2023.07.009EffectofToll-likeReceptorActivationonImmunomodulatoryFunctionofMesenchymalStemCells.SUNYue,GENGLinyu,HUANGSaisai,etal.DepartmentofRheumatologyandImmunology,TheAffiliatedDrumTowerHospitalofNanjingUniversityMedicalSchool,Jiangsu210008,ChinaAbstractObjectiveToinvestigatetheeffectofToll-likereceptor(TLR)activationontheimmunomodulatoryfunctionofmesen-chymalstemcells(MSC)frombonemarrowandumbilicalcord,andtocomparetheexpressionofTLRinbonemarrowMSCandumbilicalcordMSC.MethodsBone...