A280、A260/A230比值均高于混合酸脱钙组,表明EDTA脱钙液脱钙骨髓的DNA纯度更高。片段长度是衡量DNA质量的重要标准[4],不同分子检测技术对被检样本DNA片段长度要求不同,如杂交捕获法靶向NGS要求样本DNA片段长度≥170bp、BIOMED2试剂盒要求DNA扩增产物≥400bp。本实验通过两种方法检测DNA片段长度,核酸蛋白分析仪和RTPCR检测结果一致。EDTA脱钙组骨髓DNA主峰片段长度为(1286125±112619)bp,高于混合酸脱钙组的(9214±2135)bp,能满足日常分子检测对DNA片段长度的需求。EDTA脱钙组骨髓DNARTPCR检测的两个管家基因Ct值均明显小于混合酸脱钙组,提示相同的DNA投入量,EDTA脱钙组所含有效DNA模板量更高[5]。混合酸脱钙液脱钙速度快、脱钙时间不易控制,且易酸化组织,DNA片段降解严重。本实验的EDTA脱钙液为商品化、即用型骨髓穿刺组织脱钙液,避免人工配制引起脱钙液浓度或pH值[6]偏差影响脱钙效果,稳定性更好。该商品化EDTA脱钙液主要成分是乙二胺四乙酸二钠,脱钙性质温和,通过与钙离子螯合达到脱钙目的[7],对核酸保存效果好。提取高质量的DNA是进行分子生物学检测的先决条件,脱钙液选择不当会对DNA产生不可逆的影响。此次实验表明,与混合酸脱钙液相比,EDTA脱钙液脱钙骨髓的DNA浓度和纯度更高、片段长度更长,RTPCR检测Ct值更小。尽管EDTA脱钙液脱钙时间稍长,但能为患者提供分子检测的机会,因此本科室倾向于选择EDTA脱钙液用于骨髓穿刺组织的脱钙。参考文献:[1]MiquelestorenaStandleyE,JourdanML,CollinC,etal.Effectofdecalcificationprotocolsonimmunohistochemistryandmolecularanalysesofbonesamples[J].ModPathol,2020,33(8):1505-1517.[2]杨军,张标,马恒辉,等.FFPE组织提取DNA样本质量评价的多中心调研[J].临床与实验病理学杂志,2018,34(6):691-695.[3]沈吟芳,王谦,郭凌川.石蜡包埋中骨髓标准化脱钙的应用[J].临床与实验病理学杂志,2021,37(7):867-868.[4]O...