58现代检验医学杂志第38卷第5期2023年9月JModLabMed,Vol.38,No.5,Spet.2023KIF18B通过激活Wnt/βcatenin信号通路促进子宫内膜癌细胞增殖和转移的实验研究陆瑞,郭红霞,吴苗苗,吴志兵,姜雪,戈伍琼(南京中医药大学沭阳附属医院妇产科,江苏宿迁223600)摘要:目的探讨驱动蛋白家族成员18B(kinesinfamilymember18b,KIF18B)在子宫内膜癌组织中的表达,及促进子宫内膜癌细胞增殖和转移的作用机制。方法收集子宫内膜癌组织50例和正常子宫内膜组织30例,采用免疫组织化学染色检测KIF18B表达水平,分析KIF18B表达与子宫内膜癌患者临床病理特征的关系及对患者预后的影响。KIF18B小干扰RNA(siRNA)转染子宫内膜癌细胞Ishikawa,分为si-NC组和si-KIF18B组,蛋白免疫印迹法检测KIF18BsiRNA的转染效果;噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞的增殖能力;Transwell实验检测细胞的转移能力;双荧光素酶报告基因实验检测各组细胞中的Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路活性;蛋白免疫印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt3a和β-catenin,及其下游增殖相关蛋白cMYC,细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和转移相关蛋白基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinase,MMP-2)、基质金属蛋白酶7(matrixmetalloproteinase-7,MMP-7)的表达。结果KIF18B在子宫内膜癌组织中的阳性表达率高于正常子宫内膜组织(70.00%vs46.67%),差异有统计学意义(χ2=4.301,P=0.038)。FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移患者KIF18B阳性表达率高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期(88.89%vs47.82%)、无淋巴结转移患者(86.36%vs57.14%),差异有统计学意义(χ2=9.972,5.009;P=0.002,0.025)。KIF18B高表达组五年总生存率低于KIF18B低表达组(34.29%vs66.67%),差异有统计学意义(χ2=4.305,P=0.038)。si-KIF18B组KIF18B表达低于si-NC组(0.15±0.04vs1.01±0.03),差异有统计学意义(t=29.790,P<0.001)。第2~5天si-KIF18B组细胞增殖率低于si-NC组,差异均有统计学意义(t=3.267~11.080,均P<0.05)。si-KIF18B组细胞穿膜数目低于si-NC组(39.67±4.52个vs74.33±4.51个),差异有统计学意义(t=9.402,P<0.001)。si-KIF18B组细胞中荧光素酶相对活性低于si-NC组(0.41±0.04vs1.00±0.03),差异有统计学意义(t=20.438,P<0.001)。si-KIF18B组Wnt3a,β-catenin,cMYC,cyclinD1,MMP-2和MMP-7表达低于si-NC组,差异均有统计学意义(t=4.695~36.509,均P<0.05)。结论KIF18B在子宫内膜...