Pumilio家族基因诱导性敲除小鼠模型的构建梁海波，邓晓凤，臧敏，赵婷婷*南京医科大学生殖医学与子代健康全国重点实验室，江苏南京211166［摘要］目的：为探究出生后Pumilio家族的功能及其缺失对个体的影响，构建Pumilio1（Pum1）和Pumilio2（Pum2）双基因诱导性敲除的小鼠模型。方法：通过小鼠交配实验得到R26⁃ERT2Cre/+Pum1flox/floxPum2-/-小鼠，并将同窝雄鼠设为对照组和实验组。分别对实验组3周和成年小鼠注射他莫昔芬，在DNA、RNA和蛋白水平表征主要脏器中Pum1的敲除效果；并表征精子发生过程中的病理变化、细胞增殖及凋亡情况。结果：实验组3周和成年雄鼠的胸腺和睾丸组织中Pum1表达水平极低，敲除效率均高于50%，Pum1和Pum2双基因诱导性敲除小鼠模型构建成功。在注射他莫昔芬结束的第21天，3周雄鼠胸腺、脾脏和睾丸的重量明显下降，睾丸病理HE染色实验显示精子形成障碍，TUNEL和BrdU染色后计数结果显示睾丸中生精细胞凋亡增加、增殖减慢。成年小鼠在注射他莫昔芬恢复后，Pum1在胸腺、心、肝、睾丸中的表达仍有降低，但睾丸病理HE染色显示精子发生未见异常。结论：该模型的建立首次展示Pumilio家族蛋白作为未来药物靶标的潜能，为深入研究Pumilio的功能及作为肿瘤治疗靶蛋白的研究奠定了理论基础。［关键词］Pumilio；诱导性敲除；他莫昔芬；生殖；小鼠［中图分类号］Q78［文献标志码］A［文章编号］1007⁃4368（2023）08⁃1055⁃06doi：10.7655/NYDXBNS20230803AninducibleknookoutmousemodelforPumiliogenefamiliyLIANGHaibo，DENGXiaofeng，ZANGMin，ZHAOTingting*StateKeyLaboratoryofReproductiveMedicineandOffspringHeaith，NanjingMedicalUniversity，Nanjing211166，China［Abstract］Objective：TodeterminetherolesofPumiliofamilyinthepostnataldevelopment，weestablishedthePumilio1/Pumilio2（Pum1andPum2）inducibleknockoutmousemodel.Methods：Pum1flox/floxPum2-/-micewerematedwithR26⁃ERT2Cre/CremicetoobtainR26⁃ERT2Cre/+Pum1flox/floxPum2-/-mice.Theexperimentgroup（threeweekoldmiceandadultmice）wasinjectedwithtamoxifen，whilethecontrolgroupwasinjectedwiththesameamountofpeanutoil.TheknockoutefficiencyofPum1atDNA，RNAandproteinlevelsofmultipleorgansinmicewasdetermined.Thehistologyofthetestisaswellascellproliferationandapoptosisofthetesticularcellswereexamined.Results：ThePumilio1R...
