·基础研究·白杨素通过下调ＡｎｎｅｘｉｎＡ３逆转人肺腺癌Ａ５４９／ＤＤＰ细胞顺铂的耐药性刘晖杰１，彭荣２，许华３（１．湖北文理学院附属襄阳市中心医院肿瘤科，湖北襄阳４４１０２１；２．宜城市人民医院肿瘤科，湖北襄阳４４１０２１；３．湖北文理学院附属襄阳市中心医院审计处，湖北襄阳４４１０２１）［摘要］目的观察白杨素对肺腺癌顺铂（ＤＤＰ）耐药性细胞Ａ５４９／ＤＤＰ耐药敏感性的影响。方法取Ａ５４９和Ａ５４９／ＤＤＰ细胞，ｑＲＴＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测膜联蛋白Ａ３（ＡｎｎｅｘｉｎＡ３）基因及蛋白表达，ＣＣＫ８法测不同浓度白杨素（０、５、２５、５０、１００ｍｍｏＬ／Ｌ）干预后细胞生存率；将Ａ５４９／ＤＤＰ细胞分为Ａ５４９／ＤＤＰ组、白杨素组（５０ｍｏｌ／Ｌ）、ＡｎｎｅｘｉｎＡ３过表达组（ＡｎｎｅｘｉｎＡ３ｍｉｍｉｃ组）、ＡｎｎｅｘｉｎＡ３阴性对照组（ＡｎｎｅｘｉｎＡ３ＮＣ）、白杨素＋ＡｎｎｅｘｉｎＡ３ｍｉｍｉｃ组，另取Ａ５４９细胞正常培养作为空白对照组；ＣＣＫ８法检测细胞对ＤＤＰ的半数生存浓度（ＩＣ５０）及耐药指数；ｑＲＴＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测ＡｎｎｅｘｉｎＡ３基因和蛋白表达水平，流式细胞义监测细胞凋亡率，小鼠荷瘤实验检测移植瘤体积。结果不同浓度的白杨素均能时效依赖性和剂量依赖性降低Ａ５４９、Ａ５４９／ＤＤＰ细胞生存率（Ｐ＜００５），选取５０ｍｏｌ／Ｌ为实验浓度作用细胞４８ｈ；与Ａ５４９细胞比较，Ａ５４９／ＤＤＰ细胞ＡｎｎｅｘｉｎＡｍＲＮＡ及蛋白表达、对ＤＤＰ的ＩＣ５０、耐药指数均升高，凋亡率降低（Ｐ＜００５）；与Ａ５４９／ＤＤＰ组比较，白杨素组细胞ＩＣ５０、耐药指数、ＡｎｎｅｘｉｎＡ３ｍＲＮＡ及蛋白表达降低，细胞凋亡率升高（Ｐ＜００５），ＡｎｎｅｘｉｎＡ３ｍｉｍｉｃ组细胞ＩＣ５０、耐药指数、ＡｎｎｅｘｉｎＡ３ｍＲＮＡ及蛋白表达升高，细胞凋亡率降低（Ｐ＜００５）；ＡｎｎｅｘｉｎＡ３基因高表达可减弱Ａ５４９／ＤＤＰ细胞对白杨素的敏感性，降低细胞凋亡率（Ｐ＜００５）；小鼠荷瘤实验证实，与单独的ＤＤＰ治疗组比较，白杨素与ＤＤＰ联合治疗可显著降低小鼠Ａ５４９／ＤＤＰ移植瘤瘤体体积（Ｐ＜００５），ＡｎｎｅｘｉｎＡ３基因高表达的小鼠逆转白杨素与ＤＤＰ联合治疗效果（Ｐ＜００５）。结论白杨素可能通过下调ＡｎｎｅｘｉｎＡ３表达，逆转Ａ５４９...
