2023年第1期文章编号:1671-9646(2023)01a-0063-06第1期(总第567期)农产品加工No.12023年1月FarmProductsProcessingJan.摘要:采用聚合酶链式反应(PCR)检测方法,针对副溶血弧菌耐热溶血毒素tlh基因及其毒力基因tdh和trh基因、单增李斯特菌溶血素hly基因、沙门氏菌invA基因和大肠杆菌O157rfbe、stx1和stx2基因为靶基因设计引物,建立快速简便水产品中常见致病性微生物检测体系。通过确定统一的PCR反应条件和缩短循环时间,达到快速检测的目的。研究结果表明,建立的PCR体系,多靶点同步检测特异性为100%,致病性微生物基因组DNA的检测限约为8.28×101CFU/mL,对人工污染的水产品样品直接进行检测,检测限分别为4×103CFU/mL,2.14×103CFU/mL,8×104CFU/mL和1.07×103CFU/mL,并能在3h内完成检测。表明已成功建立水产品常见致病微生物的PCR快速检测技术。关键词:PCR;致病性微生物;快速检测中图分类号:X836文献标志码:Adoi:10.16693/j.cnki.1671-9646(X).2023.01.017EstablishmentofPCRSystemforRapidDetectionofCommonAquatic-foodPathogensXIONGZhiyong,WANGLei,*WEIYongchun,MAWenying(SchoolofMaterialsandEnvironment,BeijingInstituteofTechnologyZhuhai,Zhuhai,Guangdong519088,China)Abstract:Inthispaper,usingpolymerasechainreaction(PCR)detectionmethod,withsetsofprimersfromthetlh,tdh,trh,hly,invA,rfbe,stx1,stx2ofVibrioparahaemolyticus,Listeriamonocytogenes,SalmonellaandEscherichiaColiweredesignedtoestablishanovelmethodforrapiddetectionofcommonaquatic-foodpathogens.TheresultsshowedthatthenewestablishedPCRsystemwas100%specificityandusingthismethodwascapableofdetectingaminimumof8.28×101CFU/mLforgenomicDNA.Thismethodwasdirectlyappliedintheaquaticsamplesandthedetectionlimitwasbe4×103CFU/mL,2.14×103CFU/mL,8×104CFU/mLand1.07×103CFU/mLrespectively.Itcouldbedetectedin3h.ItreveledthatarapidPCRtechniqueforthedetectionofcommonaquatic-foodpathogenswasestablishedsuccessfully.Keywords:PCR;pathogens;rapiddetection水产品中常见致病微生物快速检测体系的建立熊志勇,王磊,*魏永春,马文英(北京理工大学珠海学院材料与环境学院,广东珠海519088)收稿日期:2022-03-04基金项目:北京理工大学珠海学院“课程思政”改革试点课程建设项目(...