新生儿早期肠道菌群的定植情况及影响因素分析_王正岭.pdf

王珍，贺磊，肖英平，等微流控芯片恒温扩增技术快速检测米饭中的蜡样芽孢杆菌浙江大学学报（农业与生命科学版），（）：杨德全，郁达义，鞠厚斌，等 基于环介导等温扩增技术的微流控芯片在宠物疫病检测中的应用展望上海畜牧兽医通讯，：时忠林，崔俊生，杨柯，等基于微流控芯片的核酸等温扩增技术研究进展中国生物工程杂志，（）：（收稿日期：）文章编号：（）新生儿早期肠道菌群的定植情况及影响因素分析王正岭（青海省妇女儿童医院 新生儿科，青海 西宁 ）摘要：目的探讨新生儿早期肠道菌群的定植情况及影响因素。方法选取 年月 年月青海省妇女儿童医院新生儿 例作为研究对象，在所有新生儿出生后第采集新鲜粪便样本，采取全自动微生物分析仪对可疑菌落实施菌种鉴定，分离菌株（肺炎克雷伯菌、肠球菌及大肠埃希菌），计算细菌定植率。统计分析粪便培养结果，并比较不同胎龄、不同分娩方式、不同抗生素应用情况的新生儿细菌定植情况。结果（）本组 例新生儿中，共检出肺炎克 雷 伯 菌 株、肠 球 菌 株、大 肠 埃 希 菌 株；（）足 月 分 娩 新 生 儿 肺 炎 克 雷 伯 菌 定 植 率（）与早产新生儿（）比较，差异无统计学意义（）；足月分娩新生儿肠球菌定植率（）低于早产者（），大肠埃希菌定植率（）高于早产者（），差异有统计学意义（）；（）顺产分娩新生儿肺炎克雷伯菌定植率（）与剖宫产者（）比较，差异无统计学意义（）；顺产分娩新生儿肠球菌定植率（）低于剖宫产者（），大肠埃希菌定植率（）高于剖宫产者（），差异有统计学意义（）；（）未应用抗生素的新生儿肺炎克雷伯菌定植率（）与应用者（）比较，差异无统计学意义（）；未应用抗生素的新生儿肠球菌定植率（）低于应用者（），大肠埃希菌定植 率（）高于应用者（），差异有统计学意义（）。结论新生儿早期肠道菌群定植主要为肠球菌、大肠埃希菌，且其定植情况与是否应用抗生素、分娩方式及是否足月具有密切关联性，临床可根据上述因素对新生儿实施对应干预，从而改善新生儿肠道菌群定植情况。关键词：新生儿；早期肠道菌群；定植；影响因素中图分类号：文献标识码：.（，）：，（，），（），（）（）（）（）；（）（），（）（），（）（）（）（）（）；（）（），（）（）中国实验诊断学 年月第 卷第期 （）（）（）（）（）；（）（），（）（），（），：；（，：）新生儿肠道菌群为复杂的动态改变过程，正常肠道菌群定植和新生儿生长发育、健康状态、免疫系统功能情况关系密切，正常肠道菌群可形成良好的肠黏膜生物屏障，能对致病菌黏附、定植于肠上皮细胞予以抑制，利于新生儿建立免疫系统，预防肠道感染等疾病。而肠道菌群定植异常则与晚发型败血症、新生儿坏死性小肠结肠炎关系密切，且可能会在一定程度上增加儿童期炎症性肠病、肥胖、哮喘、过敏等发生风险。新生儿出生后周内其肠道菌群均呈不稳定状态，且存在较大的个体差异，直至成长至个月后其肠道菌群定植情况才逐渐趋向稳定，而 该 期 间 肠 道 菌 群 的 定 植 可 受 多 种 因 素 影响。本研究选取新生儿 例旨在明确新生儿早期肠道菌群的定植情况及影响因素，以期为新生儿的早期干预提供一定参考依据。资料与方法 一般资料选取 年月 年月青海省妇女儿童医院新生儿 例作为研究对象，纳入标准：（）住院时间；（）新生儿家属知情同意本研究；（）新生儿母亲无产科合并症及重大疾病史；（）新生儿母亲产前月未采取微生态制剂、抗生素等治疗。排除标准：（）产前采取抗生素者；（）存在遗传代谢性疾病、先天性心脏病、唐氏综合征者；（）存在坏死性小肠结肠炎、肠道感染、重度窒息、消化道先天性畸形者；（）新生儿母亲存在言语沟通障碍、认知功能障碍及依从性较差者。上述研究对象中，男 例，女 例；早产 例，足月分娩 例；胎龄 周，平均（）周；分娩方式：剖宫产 例，顺产 例；抗生素应用情况：应用 例，未应用 例。本研究经医院医学伦理委员会审批通过。方法在所有新生儿出生后第采集样本，采取一次性无菌肛拭子采集新生儿的新鲜粪便，置于试管内（包含半固体培养基），于 内将其涂于大肠显色平板及血平板上，在 环境下过夜，并实施专性厌氧及需氧培养，采取 型全自动微生物分析仪对可疑菌落实施菌种鉴定，分离菌株（肺炎克雷伯菌、肠球菌及大肠埃希菌），计算细菌定植率。统计学方法数据处理采用 软件，计数资料以例数（率）描述，采用检验，计量资料采取 方差 齐 性 检 验 与 正 态 性 检验，均确认具备方差齐性且近似服从正态分布，以平均数标准差描述，组间比较采用独立样本检验；检验水准.。结果 新生儿粪便培养结果分析本组 例新生儿中，共检出肺炎克雷伯菌 株、肠球菌 株、大肠埃希菌 株。不同胎龄新生儿细菌定植情况足 月 分 娩 新 生 儿 肺 炎 克 雷 伯 菌 定 植 率（）与早产新生儿（）比较，差异无统计学意义（）；足月分娩新生儿肠球菌定植率（）低于早产者（），大肠埃希菌定植率（）高于早产者（），差异有统计学意义（），见表。表不同胎龄新生儿细菌定植情况比较（）胎龄肺炎克雷伯菌肠球菌大肠埃希菌足月分娩 （）（）（）早产 （）（）（）值.值 不同分娩方式新生儿细菌定植情况顺 产 分 娩 新 生 儿 肺 炎 克 雷 伯 菌 定 植 率（）与剖宫产者（）比较，差异无统计 ，学意义（）；顺产分娩新生儿肠球菌定植率（）低于剖宫产者（），大肠埃希菌定植率（）高于剖宫产者（），差异有统计学意义（），见表。表不同分娩方式新生儿细菌定植情况（）分娩方式肺炎克雷伯菌肠球菌大肠埃希菌顺产 （）（）（）剖宫产 （）（）（）值.值 不同抗生素应用情况新生儿细菌定植情况未应用抗生素的新生儿肺炎克雷伯菌定植率（）与应用者（）比较，差异无统计学意义（）；未应用抗生素的新生儿肠球菌定植率（）低于应用者（），大肠埃希菌定植率（）高于应用者（），差异有统计学意义（），见表。表不同抗生素应用情况新生儿细菌定植情况（）抗生素应用情况肺炎克雷伯菌肠球菌大肠埃希菌未应用 （）（）（）应用 （）（）（）值.值 讨论肠道菌群从定植开始就已成为机体生命重要组成部分，机体成长过程中，宿主和菌群间互相关联、互相影响，形成长期相对稳定但又动态改变的复杂生态系统。同时，近年随生物信息学研究不断深入及基因测序技术等发展完善，临床对肠道菌群有了进一步认知，临床证实，新生儿早期肠道菌群组成、多样性、比例变化所造成的平衡失调，可能为肠绞痛、炎症性肠病、过敏等诸多疾病发病及进展的重要因素，且会影响其生长发育情况 。因此，早期明确新生儿菌群定植情况及相关影响因素极为重要。目前，临床对新生儿肠道菌群情况进行了相关探究，如袁方等 研究证实，新生儿出生后，随着时间的推移，其肠道菌群丰度不断增加，存在随时间动态性、多样性变化的特征，且肠道菌群定植情况可受早产等因素影响。本研究对所纳入的新生儿粪便进行检测分析，结果检出肺炎克雷伯菌 株、肠球菌 株、大肠埃希菌 株，表明新生儿早期肠道菌群定植主要为肠球菌、大肠埃希菌。此外，对新生儿早期肠道菌群定植影响因素进行分析发现，不同胎龄的新生儿肺炎克雷伯菌定植情况间均无显著差异，而足月分娩者肠球菌定植率较低，大肠埃希菌定植率则较高（），表明胎龄、分娩方式及抗生素应用情况均是影响新生儿早期肠道菌群定植的相关因素。原因在于与足月新生儿比较，早产儿的机体器官尚未发育成熟，适应性欠佳，抵抗力较弱，其体质量相对较轻、胎龄较小，感染风险较大，自母体娩出后多被送至重症监护室、无菌箱等洁净环境内，此类超洁净环境虽能降低早产儿的感染风险，但不利于正常菌群（如乳酸菌、双歧杆菌等）的定植，因此肠道 菌 群 定 植 情 况 存 在 一 定 异 常。刘 尊 杰 等 学者 也指出，相较于正常的新生儿，早产新生儿机体调节能力较弱、肠道免疫功能发育欠佳，且致病菌与真菌比例增高、益生菌比值下降、菌群多样性降低、肠道菌群定植延迟，此类因素极易导致机体发生细菌移位及菌群紊乱。此外，早产儿长时间及反复暴露于广谱抗生素、延迟或缺乏肠内喂养、免疫反应不成熟等因素可扰乱微生物群建立。分娩方式也是影响新生儿早期肠道菌群定植情况的重要因素，本研究中，顺产者肠球菌定植率低于剖宫产者，大肠埃希菌定植率高于剖宫产者（），主要是顺产新生儿通过母体阴道娩出，肠道定植菌多来自母体产道，主要为厌氧菌，剖宫产者肠道定植菌则主要来源于手术室环境、医护人员，以微需氧菌及兼性厌氧菌为主 。孙琰婷等学者 研究也证实，经阴道娩出的新生儿和母体产道内相关细菌相接触，利于提升乳酸杆菌及双歧杆菌水平，促进有益菌群在肠道定植，剖宫产分娩则会降低拟杆菌门及放线菌门多样性与丰度，提升厚壁菌门内梭状芽胞杆菌、乳酸杆菌丰度，且剖宫产分娩方式还可增加新生儿和母体肢体皮肤、医护人员、医疗环境的接触几率，进而导致外界环境内表皮相关兼性需氧菌更易在肠道定植。本研究结果还证实，未应用抗生素的新生儿肠球菌定植率低于应用者，大肠埃希菌定植率高于应用者（），证实抗生素也可对新生儿早期肠道菌群定植产生重要影响，可能是因新生儿常用抗生素对大肠埃希菌敏感性较高，以致大肠埃希菌定植率异常降低，由于存在竞争关系，可导致肠球菌定植率增高。朱巍巍等学者 指出，早产儿应用头孢类抗生素联合青霉素可降低肠道双歧杆菌、梭菌、拟杆菌、乳酸杆菌含量，增加致病菌数目，且采取抗生素治疗感染还可造成新生儿正常肠道菌群构成改中国实验诊断学 年月第 卷第期变、菌群定植延迟等，严重者可出现多重耐药菌形成，因此临床需参照新生儿状况合理应用抗生素。综上所述，新生儿早期肠道菌群定植主要为肠球菌、大肠埃希菌，且其定植情况与是否应用抗生素、分娩方式及是否足月具有密切关联性，临床可根据上述因素对新生儿实施对应干预，从而改善新生儿肠道菌群定植情况。参考文献：，（）：刘婉欣应用 测序技术研究母婴肠道菌群、乳汁菌群的特征及其影响因素分析 武汉：武汉科技大学，郑耀，吴军华极低出生体质量儿肠道细菌定植的研究进展 现代实用医学，（）：，：，（）：张坤，樊赛男，吕安平，等 生命早期肠道菌群建立的影响因素 临床与病理杂志，（）：贺锐，韩璐，张丽秀，等低出生体重儿肠道微生态构建影响因素的动态监测中国微生态学杂志，（）：阎贝贝，李晓莺新生儿肠道菌群及其相关疾病研究进展中国实用儿科杂志，（）：，（）：余梦秋，屠文娟婴儿肠道菌群的定植及母乳寡糖对肠道菌群的影响中华实用儿科临床杂志，（）：王赛兰，吴丹，杨娜娜，等围产期母儿肠道微生物定植的影响因素中华围产医学杂志，（）：聂瑶，王朝霞 婴幼儿肠道菌群初始定植的影响因素 中国儿童保健杂志，（）：黄佩怡，敖当，蔡娜莉 早产儿生命早期肠道菌群的建立及其相关疾病研究进展中国微生态学杂志，（）：，：，（）：，（）：袁方，胡润芳，吴良霞，等新生儿期肠道菌群动态特征及影响因素教育生物学杂志，（）：刘尊杰，陈霞，李娟，等 新生儿重症监护病房早期新生儿肠道细菌定植影响因素及抗生素耐药性研究中华新生儿科杂志（中英文），（）：，（）：，：，（）：孙琰婷，梁宏涛，王琛，等婴幼儿肠道菌群的影响因素及其在肠道免疫中的作用 中国儿童保健杂志，（）：朱巍巍，李在玲早期抗菌药应用对早产儿肠道菌群演替的影响中华儿科杂志，（）：（收稿日期：），