JournalofChengduMedicalCollege,2023,Vol.18,No.1成都医学院学报2023年第18卷第1期33网络出版地址：https：//kns.cnki.net/kcms/detail//51.1705.R.20221227.1159.001.htmldoi：10.3969/j.issn.1674-2257.2023.01.007·论著·小檗碱通过抑制肝星状细胞自噬改善小鼠肝纤维化*谭悦浩1，李灿2，邓峰美3，张嫔4，刘漪沦4，5△1.四川护理职业学院（成都610100）；2.四川大学（成都610000）；3.成都医学院（成都610500）；4.雅安市名山区人民医院（雅安625100）；5.成都医学院临床医学院第一附属医院四川省老年医学临床医学研究中心（成都610500）【摘要】目的研究小檗碱（BBR）对肝星状细胞（HSC）自噬与活化的调控及其抗肝纤维化作用。方法分别采用不同质量浓度BBR（0、2、5、10、20、50μmol/L）干预血小板衍生生长因子-BB（PDGF-BB，20μg/L）处理的LX-2细胞24h，使用CCK-8法检测细胞活力；采用不同质量浓度BBR（0、2、5、10μmol/L）干预PDGF-BB（20μg/L）处理的LX-2细胞24h或48h，使用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷（EdU）方法检测细胞增殖率，细胞划痕实验检测细胞迁移率。实时荧光定量聚合酶链式反应、免疫印迹法检测小檗碱（5μmol/L）对LX-2细胞α-SMA，COL1A1mRNA及蛋白表达的影响；检测Atg5、Becn1、Atg7、LC3、p62的表达。动物实验共18只小鼠，随机分为3组，对照组[橄榄油（Oil）+磷酸盐缓冲液（PBS）]、模型组[四氯化碳（CCl4）+PBS]和药物干预组（CCl4+BBR），每组6只小鼠，造模5周，2次/周。第3周开始给与BBR干预，2次/周，连续给药3周。造模5周后处死小鼠，检测各组小鼠肝脏组织中的羟脯胺酸水平，苏木素-伊红（HE）和天狼星红染色观察肝脏组织炎性细胞浸润及胶原沉积情况。结果BBR作用LX-2细胞24h的半数抑制浓度（IC50）为（31.51±2.66）μmol/L；BBR可呈剂量依赖性地抑制LX-2细胞的增殖及迁移（P＜0.05）。BBR（5μmol/L）下调LX-2细胞的α-SMA、COL1A1mRNA和蛋白表达水平，抑制细胞活化（P＜0.05）。BBR（5μmol/L）下调LX-2细胞的Atg5mRNA和蛋白表达水平，上调p62蛋白表达水平及减少LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值，抑制细胞自噬（P＜0.05）。CCl4+BBR与CCl4+PBS组小鼠肝脏比较，BBR干预后，肝细胞脂肪变性坏死和炎性细胞浸润明显减轻，胶原纤维沉积减少，羟脯胺酸含量减少（P＜0.05）。结论BBR在小鼠体内具有抗肝纤维化的作用，在体外可抑制LX-2细胞的增殖、迁移及活化，这可能与BBR抑制HSC自噬水平有关。【关键词】小檗碱；自噬；肝星状细胞；...
